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Contr le de qualit de l antibiogramme

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Contr le de qualit de l antibiogramme

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Presentation Transcript

    1. Contrôle de qualité de l’antibiogramme F. OHMANI INSTITUT NATIONAL D’ HYGIENE

    2. Principe : Evaluer le lot de milieu préparé Evaluer Le lot des antibiotiques utilisés Evaluer la méthode choisie au laboratoire Travailler dans des règles de conformité strictes Obtenir les meilleurs résultats.

    3. Matériel nécessaire  : Un réfrigérateur Une étuve Un congélateur à – 80°C pour les souches Des boites de pétri stériles 90 mm Des tubes à essai à vis stériles Papier millimétré ou règle graduée Souches de référence Disques d’antibiotiques Eau physiologique Ecouvillons stériles Un distributeur de disques d’antibiotiques ou pince Milieux déshydratés Gamme de Mac Farland

    4. Méthode : Préparer le milieu Muller Hinton Préparer le milieu trypticase soya agar Sortir les souches de référence du congélateur, les repiquer sur milieux appropriés, faire des copies sur la gélose TSA en pente Les garder à 4°C.

    5. METHODE (suite 1) : Préparer les suspensions bactériennes (turbidité ˜ à 0,5 Mac Farlan) Les souches utilisées sont  : E. coli ATCC 25922 (diluée au 1/100) S.aureus ATCC 25923 (diluée au 1/10) P.aeruginosa ATCC 27853 (diluée au 1/100)

    6. METHODE (suite 2) : Tromper un écouvillon stérile Ensemencer les boites de MH en stries sur toute la surface du milieu à trois reprises en faisant tourner la boite de 60° après chaque application. Méthode de diffusion sur gélose.

    7. METHODE (suite 3) : Laisser sécher les boites 5 mn Déposer les disques d’antibiotiques Respecter la distance entre les disques ou utiliser un distributeur automatique Pas plus de 7 disques par boite. Incuber à 37°C pendant 18 à 24 h.

    8. LECTURE Mesurer les diamètres d’inhibition du germe Utiliser une règle graduée Les zones d’inhibition comprises dans les limites publiées Tableau N°1

    12. Enregistrer les résultats La date de réalisation du test Fiches spéciales de contrôle de qualité

    14. la fiche de contrôle de qualité des antibiotiques Reporter les résultats sur la fiche millimétrée Sur cette fiche figureront les données relatives à chaque association disque-souche. Comporte une indication de l’intervalle de dimensions des zones acceptables.

    15. Fiche du contrôle de qualité des tests de sensibilité à l’Amikacine pour E.coli

    16. Les résultats en dehors des limites acceptables Prendre des mesures pour améliorer la qualité du test.