1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL EQUIPOS DE LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR 2023 DE: CALCINA FUENTES, JOSUE SADOC

2. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL ÍNDICE 1. INTRODUCCIÓN .......................................................................................................... 3 2. OBJETIVOS .................................................................................................................. 4 2.1. Objetivo General ........................................................................................................... 4 2.2. Objetivo Específico ........................................................................................................ 4 3. EQUIPOS....................................................................................................................... 4 4. DESCRIPCIÓN .............................................................................................................. 4 4.1. MINI CENTRÍFUGA EPPENDORF ........................................................................... 4 4.2. TUBOS EPPENDORF ............................................................................................... 5 4.3. TERMOCICLADOR CONVENCIONAL .................................................................... 6 4.4. PCR EN TIEMPO REAL ........................................................................................... 7 4.5. SISTEMA DE ELECTROFORESIS ............................................................................ 7 4.6. NANODROP ............................................................................................................ 8 4.7. CENTRIFUGA REFRIGERADA ............................................................................... 9 4.8. CONCENTRADOR DE MUESTRAS ....................................................................... 10 5. CONCLUSIONES ........................................................................................................ 10 6. BIBLIOGRAFÍA .......................................................................................................... 11

3. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 1.INTRODUCCIÓN En el presente informe se observa los distintos equipos pertenecientes al laboratorio de Biología Molecular de la Escuela Profesional de Ingeniería Ambiental, esta visita técnica al laboratorio nos muestra equipos como: Mini centrífuga Eppendorf, tubos Eppendorf, Termociclador Convencional, Termociclador en tiempo real (PCR), Sistema de Electroforesis, Centrífuga Refrigerada, Fluorómetro, NanoDrop One C y Centrífuga 5247-R. El laboratorio de Biología Molecular nos muestra una amplia variedad de equipos especializados que son fundamentales para llevar a cabo investigaciones y análisis en el área molecular. Estos equipos desempeñan un papel crucial en el estudio de los componentes y procesos moleculares que ocurren en los organismos vivos, proporcionando herramientas precisas y eficientes para la manipulación y análisis de muestras biológicas. En conjunto, estos equipos representan una gama diversa de herramientas tecnológicas que son fundamentales en la realización de investigaciones en el campo de la biología molecular. Esta visita nos sirvió de guía para ver y comprender mejor el funcionamiento de los equipos presentes en este laboratorio. Esta experiencia se concretó con éxito y por medio de este informe se resalta lo aprendido y la literatura revisada para conocer más sobre estos equipos de laboratorio.

4. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 2.OBJETIVOS 2.1. Objetivo General -Identificar los equipos de laboratorio de biología molecular. 2.2. Objetivo Específico -Conocer los equipos usados en el análisis de secuencia de ADN. -Identificar los sistemas de centrifuga y sistema de electroforesis. 3.EQUIPOS •Mini centrífuga Eppendorf •Tubos Eppendorf •Termociclador Convencional •Termociclador en tiempo real (PCR) •Sistema de Electroforesis •Centrífuga Refrigerada •Fluorómetro •NanoDrop One C 4.DESCRIPCIÓN 4.1. MINI CENTRÍFUGA EPPENDORF Las tareas cotidianas de centrifugación son más fáciles con las mini centrífugas MiniSpin y MiniSpin plus. Ambas ofrecen un cierre suave de la tapa con un solo dedo para un bloqueo ergonómico de la tapa y una apertura automática de la tapa al final de cada ciclo para evitar el calentamiento de las muestras y permitir un fácil acceso a las mismas. Algunas de sus características se muestran en el siguiente cuadro:

5. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Figura 1.Mini centrifuga Eppendorf 4.2.TUBOS EPPENDORF Los microtubos Eppendorf son el punto de referencia para la preparación simple y segura de muestras, ofreciendo las opciones de tapón a presión de fácil acceso o tapón de rosca seguro. Algunas de sus aplicaciones son: •Procesamiento más fácil de muestras hasta 5,0 mL •Mayor rendimiento en el aislamiento de ADN, especialmente en muestras con una cantidad limitada del material inicial

6. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL •Aplicaciones cómodas y seguras de cultivo celular •El acceso fácil a las muestras reduce el riesgo de contaminación •Preparación de mezclas maestras y tampones •Requiere menos espacio de almacenaje •Lisis de células y tejidos segura Figura 2.Tubos Eppendorf 4.3.TERMOCICLADOR CONVENCIONAL Este equipo es utilizado en biología molecular, que hace posible obtener de forma rápida y precisa, grandes cantidades de ADN, necesarios en la biología molecular, diagnóstico clínico, investigaciones forenses e investigaciones de enfermedades infecciosas.

7. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Figura 3.Termociclador Convencional 4.4.PCR EN TIEMPO REAL El termociclador del equipo debe ser capaz de mantener una temperatura uniforme para todas las muestras y ser lo suficientemente rápido en la transición de temperaturas de una etapa a otra (desnaturalización del ADN molde, alineamiento de los oligonucleótidos y síntesis). El sistema fluorométrico consiste en una fuente de energía para excitar a los fluoróforos (a una determinada longitud de onda de excitación) y un sistema de detección, que permita monitorear la señal emitida (a una longitud de onda de emisión). Figura 4.PCR en tiempo Real 4.5.SISTEMA DE ELECTROFORESIS La aplicación básica de las técnicas de electroforesis de ADN es la separación de fragmentos de ADN en una muestra y su visualización, para comprobar aspectos como el tamaño de los fragmentos, la concentración, la entereza y otros. La electroforesis en gel es una técnica muy utilizada para separar moléculas o fragmentos de moléculas de

8. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL ácidos nucleicos. Los materiales más comunes para separar moléculas de ácidos nucleicos son polímeros como la poliacrilamida o la agarosa. En el caso de los geles de agarosa, se le añade bromuro de etidio, sustancia que se intercala entre las bases del DNA y es fluorescente cuando se ilumina con luz ultravioleta. Figura 5.Equipo de electroforesis 4.6.NANODROP Una cubeta para mediciones espectrofotométricas es un recipiente pequeño, rectangular y transparente disponible en diversos materiales, niveles de calidad y dimensiones. Las cubetas de vidrio se usan para las mediciones en el rango visible de 320 a 2500 nm. Las cubetas de cuarzo ofrecen resultados precisos en todo el rango UV y visible de 200 a 2500 nm. Cuanto menor sea la tolerancia de fabricación, mejor y más repetible será la medición.

9. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL Figura 6.Equipo Nanodrop 4.7.CENTRIFUGA REFRIGERADA Equipo que se utiliza para separar soluciones, generalmente en una fase líquida o sobrenadante (que corresponde a la porción superior de la muestra) y una fase sólida (también llamada sedimento o pellet) la que se deposita en el fondo del tubo. Figura 7.Centrifuga refrigerada

10. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL 4.8.CONCENTRADOR DE MUESTRAS Un Concentrador de muestras es un equipo de laboratorio que se utiliza, como su nombre lo indica, para concentrar muestras que posean residuos de solventes, producto del proceso de extracción. Este proceso se lleva a cabo utilizando un sistema de inyección de gas, que generalmente es nitrógeno o aire comprimido, lo que ayuda a que la evaporación se genere de manera más rápida que el método convencional. La concentración de muestras es una etapa clave en los procesos de análisis y evaluación de las mismas, en técnicas avanzadas como la cromatografía y espectrometría de masas y el uso de un Concentrador ayuda a que estos procesos se lleven a cabo de manera más expedita y eficiente. Figura 8.Concentrador de muestras 5.CONCLUSIONES •El nuevo laboratorio de biotecnología de las instalaciones de la UNAM cuenta con equipos de última generación. •Este centro de investigación propone ser un referente a nivel regional y nacional, en el área del conocimiento de la biotecnología, con el desarrollo de aplicaciones biotecnológicas industriales y medioambientales. Permitirá el uso colaborativo con investigadores y docentes de Ingeniería Ambiental, Ingeniería Pesquera, Ingeniería Agroindustrial con incidencia en la biotecnología ambiental, microbiología,

11. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL agrobiotecnología facilitando los equipos material biológico, de laboratorio y sobre toda la experiencia de los investigadores. •Por lo general este tipo de equipos están orientados a investigaciones de biología molecular, que nos permiten la aplicación de técnicas moleculares, permitiendo el estudio de genomas o secuenciaciones específicos como el ADN, entre otras aplicaciones 6.BIBLIOGRAFÍA •Cariaga Martinez, A. E. (2007). EL LABORATORIO DE. Obtenido de https://editorial.unam.edu.ar/images/documentos_digitales/El_laboratorio_de_biolog ia_molecular-Ariel_Ernesto_Cariaga_Martinez__Pedro_Dario_Zapata.pdf •Central, u. (2021). Biologia molecular y sus aplicaciones. Obtenido de https://www.ucentral.edu.co/noticentral/biologiamolecular#:~:text=%E2%80%9CLa %20biolog%C3%ADa%20molecular%20es%20una,la%20funci%C3%B3n%20y%20 mantenimiento%20molecular%E2%80 %9D.(2019, January 7). ELECTROFORESIS DE GEL. Youtube. •2021, February 1). Cabinas de Bioseguridad: Protocolo de Uso y Biomecánica. Youtube. https://www.youtube.com/watch?v=0Wa-cxqayK8 •Rivera, G., Tavara, M. & Champi, J. (2021). ELECTROFORESIS. UNAM, 1. (2022, September 1). ULTRACONGELADORES. Catalogodelasalud.https://www.catalogodelasalud.com/documenta/contenido/119725/ ULTRACONGELADORES.pdf