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1. Protenas totais e sricas
2. Protenas totais e sricas
Protenas totais
Albumina
Globulinas
3. Protenas totais Existem mais de 300 protenas diferentes j identificadas no plasma sanguneo.
Apenas algumas so avaliadas rotineiramente
Amostras mais usadas: sangue, urina, LCR, lquido amnitico, peritonial, pleural ou sinovial, saliva ou fezes.
4. Protenas totais Funes:- transporte- manuteno da presso coloidosmtica- tamponamento de ?pH- imunidade humoral- atividade enzimtica- coagulao- resposta da fase aguda
5. Protenas totais A concentrao das protenas plasmticas determinada por trs fatores:- Velocidade de sntese: A maioria produzida no fgado. Cerca de 25g/dia num indivduo de 70kgs- Volume de lquido: Cerca de 250g de protenas so encontradas no compartimento vascular de um homem de 70kgs, dando uma concentrao ao redor de 7,0g/dl
6. Protenas totais - Velocidade do catabolismo: As protenas totais so degradadas, liberando aminocidos para a sntese de protenas celulares.
7. Protenas totais Determinao das protenas totais:- Mtodo do Biureto: O cobre, em meio alcalino, reage com a ligao peptdica. O produto apresenta bandas de absoro.Interferentes: Substncias que possam reagir com o on cprico. Ex: Bilirrubina aumentada, triglicerdeos acima de 500mg/dlVR soro: 6,0 8,0g/dl
8. Protenas totais Outros mtodos:- Mtodo de Lowry- Mtodo de Bradford- Mtodo de Smith
Paciente: Jejum de 8 horasAmostra: soro sem hemlise e no lipmico
9. Protenas totais Hiperproteinemia
- Desidratao (vmito, diarria ou acidose diabtica)- Mieloma mltiplo- Cirrose heptica- Hepatite ativa crnica- Lupus eritematoso sistmico- Infeces bacteriana crnica Hipoproteinemia
- Hemodiluio- Perda renal de protenas- Queimaduras severas-Desnutrio (Kwashiorkor) -Hipertireoidismo-Hemorragia grave
10. Albumina Representa cerca de 60% das protenas do plasma humano.
Meia vida de 15-19 dias
Velocidade de sntese depende da ingesto protica e regulada por feedback negativo pelo teor de albumina circulante
Produo de cerca de 15g/ dia
11. Albumina Funes- Regulao osmtica- Transporte e armazenamento : cidos graxos e esterides; bilirrubina; frmacos
Sntese : no fgado, na forma de pro-albumina.
Degradao: mecanismo desconhecido, degradadas aleatoriamente (novas e velhas), provavelmente pelos endotlio dos capilares, medula ssea e sinusides hepticos.
12. Albumina Determinao da albumina- Mtodos de corantes: Metil orange, HABA, verde de bromo cresol(VBC) e prpura de bromocresolVR: 3,5 a 5,5g/dl - Eletroforese
- Fracionamento salino
13. Albumina Paciente : No consumir dieta rica em gordura por 48hr antes da prova
Amostra: soro, observar postura dos pacientes, pois em pacientes ambulatoriais o teor de albumina cerca de 0,3g/dL maior que em pacientes hospitalizados.
Interferncias: Elevao? ACO, agentes citotxicos. Reduo ? Paracetamol, aspirina, ACO, ampicilina
14. Albumina Hiperalbuminemia - rara
- Encontrada em casos de carcinomatose metasttica, desidratao aguda, diarria, estresse, febre reumtica, meningite, osteomielites, traumatismo, tuberculose, hemoconcentrao, entre outros.
15. Albumina Hipoalbuminemia- Reduo da sntese: Cirrose- Ingesto inadequada de protenas: A sntese reduzida a um tero durante um jejum de 24hr- Perda protica extravascular: Sndrome nefrtica (proteinria massiva) e enteropatia perdedora de protenas
16. Albumina - Queimaduras extensas : a pele o maior local de armazenamento extravascular da albumina.- Hemodiluio: Ascites, ICC-Estresse- Analbuminemia- Bisalbuminemia
17. Albumina Conseqncias da hipoalbuminemia- Edema facial, macroglossia, ictercia conjuntival- Bradicardia, hipotenso, cardiomegalia- Hepato-esplenomegalia, ascites- Encefalopatias- Atrofia testicular- Ginecomastia, hipotermia
18. Fracionamento eletrofortico A eletroforese de protenas (EFP) no soro uma tcnica simples para separar as protenas do soro. o teste de triagem mais utilizado para investigao de anormalidades das protenas sricas. Em condies normais, so separadas cinco bandas do soro: albumina, alfa-1, alfa-2, beta e gamaglobulinas. Eventualmente, pode ser observada a presena da pr-albumina.
19. Fracionamento eletrofortico
20. Eletroforese
21. Fracionamento eletrofortico
22. Globulinas Regio a1-Alfa1-antitripsina (AAT) Tem como funo a inibio de vrias proteases provenientes dos neutrfilos.Proteo contra destruio da parede alveolarVR: 20 - 60mol/L
23. Globulinas - Alfa1-glicoprotena cida(AAG) Tem como funo primria inativar a progesterona, alem de interagir com alguma drogas. Aumentada na artrite reumatide, Lpus, queimaduras e infarto. O papel exato da AAG no conhecido-Alfa1-Fetoprotena (AFP) Usada para detectar defeitos de tubo neural em fetos, examinado atravs do lquido amniticoVR lquido amnitico: 5 a 25mg/dl-Alfa 1- Lipoprotena Transportadora de lipdeos
24. Globulinas Regio a2-Haptoglobina (HAP)? Transportadora de Hb para o retculo endotelial para ser degradada. Aumentada durante os processos inflamatrios e diminuda em sndromes hemolticas.
- Alfa2-macroglobulina?inibidora de proteases. Aumentada durante a infncia e na sndrome nefrtica e est diminuda em hepatopatias crnicas.
- Ceruplasmina (CER)? fixadora de cobre. Est diminuda nas anemias e aumentada em neoplasias malignas; protena de fase aguda tardia.
25. Globulinas Regio 1-Transferritina(TRF)?Transporta o ferro do intestino at a medula ssea. Est aumentada na depleo de ferro e diminuda nas perdas proticas e hepatopatias crnicas. -Hemopexina (HX) ?Transporta o grupamento Heme at o fgado-Beta-lipoprotena? Transportadora de lipdeos-Complemento C4? Resposta humoral, participa da via clssica do complemento. A deficincia resulta reduo da resposta a infeces.
26. Globulinas Regio 2- Fibrinognio? Substrato da trombina, no encontrado em fracionamentos eletroforticos pois a amostra usada o soro -Complemento frao C3? Atua na resposta imunolgica humoral- Beta2- microglobulina (BMG)? Protena usada para testar a funo tubular renal. Elevada em IR
27. Globulinas Regio ?-Protena C reativa? Marcador no-especfico de leso tecidual, infeco ou necrose celular associada com infarto ou malignidadeVR: 80-800g/dl
28. Globulinas Regio ?- Imunoglobulinas?Sintetizadas pelo sistema imune em resposta a uma partcula estranha.
-Reconhecem,reagem,neutralizam bactrias, vrus e protenas estranhas.
-Constitudas por protenas com estrutura em y.-4 cadeias: 2 leves(L) e 2 pesadas(H)- Antgeno se liga a regio varivel das cadeias.- IgG, IgM, IgA, IgD e IgE
29. Globulinas ImunoglobulinasIgG (1,2,3,4)?85% das Ig totais, atravessa a barreira placentriaVR:800-1800mg/dlIgM? 5-10% das Ig totaisVR: 50-150mg/dlIgE? importante papel na atopia e imunidade antiparasitriaVR:0-0,2mg/dl
30. Globulinas Hipogamaglobulinemia-Imunodeficincias hereditrias-Imunodeficincia adquirida: neoplasias linfides, IR, terapia imunossupressiva-Mieloma mltiplo, leucemia linfoctica crnica-Crianas prematuras-Frmacos: Fenitona, carbamazepina, c. Valprico
31. Globulinas Gamopatias policlonais-Aumentos difusos das gamaglobulinemias-Causado por: lepra, tuberculose, cirrose biliar primria, cirrose portal, hepatite crnica ativa, doena de Crohn, lpus eritematoso sistmico Gamopatias monoclonais-Encontrada em: Mieloma mltiplo, macroglobulinemia de Waldenstrm, doena da cadeia pesada (doena de Franklin)
32. Globulinas
Eletroforese de protenas sricas em gel de agarose,
(1) hipergamaglo-bulinemia em processo inflamatrio; (2) e (3): fracionamento normal;
(4) gama monoclonal no mieloma mltiplo.
33. Globulinas Perfis eletroforticos patolgicos:
-Mau fornecimento protico: albumina? , ?1 e ?2?, ??, ??
-Perdas proticas Sndrome Nefrtica: albumina?? , ?1?, ?2??, ??, ? (varia)
-Hepatite crnica: albumina?, ??
-Hepatite aguda: albumina? ou normal, ?1?, ?2 normal ou ?, ? e ??
-Cirrose: albumina?? , ?1?,?2 normal ou ?, ??, fuso das fraes ? e ?
34. Globulinas
35. Protenas totais e sricas Palavras chave- protenas sricas
- albumina
- globulina
- eletroforese
- imunoglobulina Key words- serum proteins- albumin- globulin- electrophoresis- immunoglobulin
36. Protenas totais e sricas Bibliografia- Motta, Valter Bioqumica clnica para o laboratrio: princpios e interpretaes 4ed. Porto Alegre: Editora Mdica Missau;2003-Ravel, Richard Laboratrio clnico- 6ed.Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan; 1997- Zaia,D.A.M et al Determinao de protenas totais via espectrofotometria: vantagens e desvantagens dos mtodos existentes. Qumica nova 21(6), 1998.-Laboratrio AutoLab. Disponvel em: www.laboratorioautolab.com Acesso em 25/07/2007- LabTest. Disponvel em: www.labtest.com.br Acesso em 23/08/2007