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Passaggi dell’inizio di traduzione Formazione complesso 43S

Passaggi dell’inizio di traduzione Formazione complesso 43S Reclutamento del complesso 43S sul 5’ dell’mRNA Scanning del 5’ UTR e riconoscimento dell’AUG Formazione del complesso 80S. eIF2 3 subunità: a, b, g

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Passaggi dell’inizio di traduzione Formazione complesso 43S

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Presentation Transcript

  1. Passaggi dell’inizio di traduzione Formazione complesso 43S Reclutamento del complesso 43S sul 5’ dell’mRNA Scanning del 5’ UTR e riconoscimento dell’AUG Formazione del complesso 80S

  2. eIF2 • 3 subunità: a, b, g • Subunità b aiuta attività di GTPasi e modula il legame tRNAi-eIF2 g • Subunità a è un regolatore della traduzione. E’ fosforilata (ser 51) da diverse chinasi in risposta a stress • eIF2B • 5 subunità: a, b, g, d, e • Fattore di scambio GDP-GTP (GEF) per eIF2 • 2 subcomplessi: d, e attività catalitica a, b, g attività regolativa

  3. Complesso MFC

  4. eIF3 • 10-11 subunità • Nucleo di 5 subunità: eIF3a, b, c, i, g • In lievito forma un complesso con eIF1, eIF2, eIF5, Met-tRNAi (MFC) • Richiesto per il legame del 43S all’mRNA

  5. Reclutamento 43S-mRNA

  6. Complesso 43S-mRNA

  7. eIF4F

  8. eIF4F • Composto da 3 subunità eIF4A: elicasi, aiutato da eIF4B eIF4E: cap binding protein, regolato da fosforilazione e interazione con eIF4E-BP eIF4G: adattatore, interagisce con diversi fattori

  9. eIF4G

  10. _ A GCC CCAUGG G La sequenza consenso di Kozak Negli eucarioti i ribosomi migrano dalla estremità 5’ dell’mRNA fino al sito di legame del ribosoma, che include un codone di inizio AUG.

  11. Scanning

  12. Formazione complesso 80S

  13. “Toeprint assay”

  14. Scanning • 40S, ATP, eIF2, eIF4A, eIF4B, eIF4F, mRNA sufficienti per formare complesso I (non produttivo) • eIF1, eIF1A necessari per il complesso II (scanning fino all’AUG) • Se non ci sono strutture secondarie eIF4A, 4B, 4F non sono necessari (in vitro)

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