300 likes | 793 Vues
HBsAg- ის თვისობრივი ტესტისა და B ჰეპატიტის ვირუსის PCR -ის კორელაციის დადგენა. ვარდენ ჯიჯიაშვილი IV კურსი გამოყენებითი ბიომეცნიერება და ბიოტექნოლოგიები ხელმძღვანელი - პროფ. თენგიზ ცერცვაძე ხელმძღვანელი (თსუ-დან) - ასოც. პროფ. ნინო გაჩეჩილაძე თბილისი, 2013 წ. განსახილველი თემები.
E N D
HBsAg-ის თვისობრივი ტესტისა და B ჰეპატიტის ვირუსის PCR-ის კორელაციის დადგენა ვარდენ ჯიჯიაშვილი IV კურსი გამოყენებითი ბიომეცნიერება და ბიოტექნოლოგიები ხელმძღვანელი - პროფ. თენგიზ ცერცვაძე ხელმძღვანელი (თსუ-დან) - ასოც. პროფ. ნინო გაჩეჩილაძე თბილისი, 2013 წ
განსახილველი თემები B ჰეპატიტის ეპიდემიოლოგია დაავადებები ადამიანში ვირუსის სტრუქტურა ლაბორატორიული დიაგნოსტიკის მეთოდები HBsAg-სანტისხეულების იმუნოფერმენტული განსაზღვრა პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის მეთოდი (Real time-PCR) მეთოდების შედარება დასკვნა
B ჰეპატიტი აღმოჩენილია მე-19 საუკუნეში • დღესდღეობით ფართოდაა გავრცელებული • ხშირად გვხვდება ქრონიკული ხასიათის • Hepadna – hepa-ღვიძლი; dna-დნმ
ეპიდემიოლოგია მწვავე და ქრონიკული B ჰეპატიტის გავრცელება
ქრონიკული B ჰეპატიტის ხვედრითი წილი ვირუსული ჰეპატიტებით ავადობაში 2008-2010 წლებში
ქრონიკული B ჰეპატიტით დაავადებულთა ასაკობრივი სტრუქტურა საქართველოში 2008-2010 წლების მონაცემებით 100 000 მოსახლე
ქრონიკული B ჰეპატიტით ავადობის დინამიკა საქართველოში 443 600 მოსახლე
ქრონიკული B ჰეპატიტის ტერიტორიული განაწილება საქართველოში 2008-2010 წლების მონაცემებით
პათოლოგიები • ჰეპატოციტების ინფიცირება • იმუნური სისტემის რეაგირება • მეორადი ვირუსემია
ვირუსის სტრუქტურა • HBs- უზრუნველყოფს ადსორbციას • HBe- რეპლიკაციის მარკერი • HBc- დეინის ნაწილაკის შუაგულშია
დიაგნოსტიკა • სადიაგნოსტიკო მეთოდები იყოფა სკრინინგულ და დამადასტურებელ მეთოდებად • მეთოდები ერთმანეთისაგან განსხვავდებიან სპეციფიურობით და მგრძნობელობით
იმუნოფერმენტული მეთოდი • იმუნოფერმენტული მეთოდი გამოიყენება საკვლელვ ნიმუშში კონკრეტული ანტისხეულის ან ანტიგენის აღმოსაჩენად • HBV-ს დასადგენად ყველაზე ხშირად იკვლევენ HBsAg
Mmyarfazianiifa, imunofluorescencia Roche Elecsys • ავტომატიზირებული სისტემა • დაანგარიშებული შედეგები • მოქნილი ფუნქციები • სპეციფიურობა-98.8% • მგრძნობელობა-98.5%
აქტუალობა • დიაგნოსტიკაშიძირითადად გამოიყენება იმუნოფერმენტული მეთოდი • მკურნალობის პერიოდში ვირუსის საკონტროლოდ მიმართავენ Real-Time PCR მეთოდს
Real-Time PCR • Real Time PCR მონაცემებს გვაძლევს გრაფიკის სახით • მისი სპეციფიურობა და მგრძნობელობა 99.9%-ია • უზრუნველყოფს დნმ-ის სამიზნე ფრაგმენტის ამპლიფიკაციას • შესაძლებელია ინფექციური აგენტის გამოვლენა
Real-Time PCR • პრინციპი ემყარება ტემპერატურულ რეჟიმებს • თითოეული ციკლის შემდეგ დნმ-ის ფრაგმენტი ორმაგდება • წარმოქმნილი ამპლიკონები წარმოადგენენ მატრიცებს
ტესტების მგრძნობელობა
კვლკევის მიზანი ჩვენი კვლევის მიზანი იყო: • შეგვეფასებინა სხვადასხვა ტესტ სისტემების ეფექტურობა B ჰეპატიტის დიაგნოზირებაში • გამოგვევლინა ყველაზე მაღალსპეციფიური და მაღალმგრძნობიარე მეთოდი B ჰეპატიტის დიაგნოზირებაში პჯრ-თან მიმართებაში.
გამოყენებული მასალა და მეთოდები მასალა • 21 ადამიანის სისხლი • პჯრ საშუალებით 14-ს დაუდასტურდა
მიღებული შედეგები • იმუნოქრომატოგრაფიული მეთოდით (rapid) დეტექტირებული იქნა 9 პაციენტში, 5-ში ცრუ უარყოფითი • თხევადფაზიანი იფა-თი 12 პაციენტში • მყარფაზიანი იფა-თი და იმუნოფლუორესცენციით 13 პაციენტში • იმ პაციენტის შემთხვევაში რომელშიც დადებითი ვერ მივიღეთ, პჭრ-ის შედეგმაც ძალზედ მცირე ვირუსის რაოდენობა ჩვენა
დასკვნები • პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია წარმოადგენს ვირუსის სისხლში არსებობა/არარსებობის და მისი ციკლის კონტროლირების ყველაზე საიმედო ტესტს, • პჯრშემდგომ პირველობა სადიაგნოსტიკო ტესტ სისტემებში საიმედოობის, მაღალმგრძნობელობის, მაღალსპეციფიურობის მხრივ ეკუთვნის იმუნოფლუორესცენტულ კვლევას და მიკრონაწილაკოვან, მყარფაზიან იფა-ს, • ჩვეულებრივი, თხევადფაზიანი იფა წარმოადგენს, მართალია ყველაზე პოპულარულ, გამოყენებად და ხელმისაწვდომ მეთოდს ლაბორატორიულ დიაგნოსტიკურ საშუალებებს შორის, მაგრამ მისი საიმედოობა მხოლოდ 80-90%,
დასკვნები • ხოლო სწრაფი მარტივი იმუნოქრომატოგრაფიული ტესტ სისტემები შეიძლება გამოყენებული იქნან მხოლოდ საველე პირობებში, სადაც სხვა აპარატურასთან წვდომა არ არის, ვინაიდან მათი საიმედოობა მხოლოდ 70-80%, რაც არასაკმარისია სწორი დიაგნოზირებისათვის, მაგრამ ისეთპირობებში, სადაც შეუძლებელია ლაბორატორიული აპარატურით სარგებლობა ( მაგ. დროებით სამხედრო ჰოსპიტალებში საომარი ოპერაციების დროს) ისინი ქმნიან კარგ ალტერნატივას, ვინაიდან არ საჭიროებენ არანაირ დამატებით აპარატურას და ხსნარებს.
გმადობთ ყურადთებისათვის!