*Gaziantep Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Yönetim Birimi ve

1. Dizel Egzoz Partiküllerinin (DEP) KOAH’lı Hastalardan Elde Edilen Bronş Epitel Hücrelerinin Canlılığı ve Apoptozisi Üzerindeki Etkisi * Hasan Bayram1,2, Bülent Gögebakan2, Öner Dikensoy1, Serdar Öztuzcu3, Serpil Güldal1,2, Erhan Ekinci1. Gaziantep Üniversitesi Tıp Fakültesi, 1Göğüs Hastalıkları AD, 2 Hücre Kültürü Laboratuarı, 3Moleküler Biyoloji Laboratuarı, Gaziantep. *Gaziantep Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Yönetim Birimi ve TÜBİTAK tarafından mali olarak desteklenmiştir.

2. Giriş-1 • Partiküler hava kirliliği ile respiratuar morbidite ve mortalite arasında ilişki (Samet JM, et al. N Engl J Med 2000) (Atkinson RW, et al. Am J Respir Crit Care Med 2001) • Dizel egzoz partikülleri (DEP) primer insan bronş epitel hücrelerinden (BEH) inflamatuar mediyatörlerin salınımını artırmaktadırlar. (Bayram H, et al. Am J Respir Cell Mol Biol 1998).

3. Giriş-2 • DEP, serumsuz ortamda, hücre siklüsünü uyarmak, apopitozisini baskılamak suretiyle canlı A549 hücre sayısını artırmaktadır. • DEP bu etkilerini oksidatif stresi artırarak, p21CIP1/WAF1 ekspresyonunu baskılayarak, JNK ve NF-B yolaklarını uyararak yapmaktadır (Bayram H et al, Eur Respir J 2006)

4. Giriş-3 • DEP’nin KOAH’lıların BEH canlılığını etkileyip etkilemedikleri bilinmemektedir.

5. Amaç • DEP’nin KOAH’ı olan ve olmayan primer BEH • Canlılığı • hücre apoptozisi üzerine etkisini araştırmak • N-acetylcysteine (NAC) ve JNK inhibitorünün (SP600125) DEP’nin yol açtığı değişikliklere etkisini araştırmak

6. Hastaların Demografik Özellikleri

7. Hücre Kültürü

8. Hücre Canlılığı • Hücrelerin 0, 5,10, 50 ve 100g/ml DEP ile 24, 48 ve 72 saat inkübasyonu • 10 ve 100g/ml DEP varlığında/yokluğunda NAC (3.3, 10,33mM) ve JNK inh (SP600125; 3.3, 10 ve 33M) ile 48s inkübasyonu • MTT ile hücre canlılığı

9. Akım Sitometri • Hücrelerin 100g/ml DEP ile 48s inkübasyon • Akım sitometri (FACS) yöntemi ile propidium iodide/Annexin V boyası kullanılarak apoptozis tayini

10. DEP’nin Sigara İçmeyenlerin Bronş Epitel Hücre Canlılığına Etkisi ***p<0.0001

11. DEP’nin Sigara İçicilerin Bronş Epitel Hücre Canlılığına Etkisi **p<0.001 ***p<0.0001

12. DEP’nin KOAH’lı Hastaların Bronş Epitel Hücre Canlılığına Etkisi ***p<0.0001 ***p<0.01 **p<0.001

13. N-Asetilsisteinin DEP ile 48s İnkübe Edilen KOAH’lı Hücre Canlılığına Etkisi

14. JNK İnhibitörünün DEP ile 48s İnkübe Edilen KOAH’lı Hücre Canlılığına Etkisi

15. DEP ile 48s İnkübasyonun KOAH’lı Hücrelerin Apoptozisine Etkisi SF

16. Özet • DEP (100μg/ml) BEH canlılığını • sigara içmeyenlerde 72 s, • sigara içenlerde 48 ve 72 s, • KOAH’lılarda 24, 48. ve 72. saatlerde azalttı. • NAC KOAH’lı BEH canlılığını azalttı • JNKinh serumsuz ortamda ve 10g/ml DEP varlığında KOAH’lıların hücre canlılığını baskılarken, 100g/ml DEP’nin baskıladığı hücre canlılığını artırdı • 100g/ml DEP KOAH’lı BEH’nin apoptozisini artırdı.

17. Sonuç • DEP primer bronş epitel hücrelerin canlılığını baskılamakta ve apoptozisini artırmaktadır. DEP bu etkilerini JNK gibi hücre içi sinyal ileti yolaklarını etkilemek suretiyle gerçekleştirmektedir. • KOAH’lıların BEH’leri DEP’nin etkilerine daha hassastır.

18. Teşekkür

19. Teşekkür

20. Sabrınız İçin Teşekkür Ederim