Aktuálne informácie z laboratórneho vyšetrovania

Aktuálne informácie z laboratórneho vyšetrovania Úradná kontrola – čerstvé mäso hydiny Selma Jacková Zuzana Büchlerová ŠVPS SR 31. máj – 1.jún 2007 3.-4. december 2007, IVVL Košice

Z pohľadu laboratórnej diagnostiky je na úseku hydiny prvoradé sledovanie výskytu mikroorganizmov rodu Salmonella 1. Všeobecne o salmonelách 2. Diagnostika salmonel 3. Sledovanie salmonel v hydine

1. Všeobecne o salmonelách • čeľad Enterobacteriaceae • gramnegatívne, nesporulujúce, pohyblivé tyčinky 0,5 – 0,8 µm široké 1-3,5 µm dlhé. • Nepohyblivé - Salmonella gallinarum a Salmonella pullorum • rast v prostredí s kyslíkom ale aj bez kyslíka, od 6oC do 50 oC, (najlepšie pri 37 oC) rýchlo sa rozmnožuje aj pri izbových teplotách Prežíva dlhodobo aj chladenie a mrazenie, spoľahlivo ju ničia teploty nad 66 oC.

Salmonely v elektrónovom mikroskope

1. Všeobecne o salmonelách Ako prvý bol odhalený pôvodca abdominálneho týfusu Eberthom a Kochom v roku 1880, prvá izolácia sa podarila v roku 1884. Pomenovanie – Salmonella - po americkom veterinárnom lekárovi, Danielovi Elmerovi Salmonovi, ktorý objavil Salmonellu cholerasuis. Pomenovanie rodu „Salmonella“ bolo prvýkrát použité v roku 1900 pre pôvodcu ochorenia prasiat a v roku 1933 bol tento názov celosvetovo kodifikovaný.

1. Všeobecne o salmonelách Taxonómia salmonel Od roku 2005 2 druhy S. bongori S. enterica (predtým nazývaná S.choleraesuis) • subspecies: subspecies enterica, salamae, arizonae, diarizonae, houtenae a indica • Prevažná väčšina humánnych a živočíšnych izolátov patrí do subspecies S. enterica • sérovary podľa zloženia somatických a bičíkových antigénov • viac ako 2 500 sérovarov salmonel

1. Všeobecne o salmonelách Stúpajúci trend počtu salmonelóz u ľudí v 80-tych rokoch Zvýšená incidencia S.Enteritidis prispôsobenie sa určitých fagotypov na kura domáceho. • vyrovná sa špecifickým sérotypom pre hydinu ako S. gallinarum a pullorum • bez zjavného ochorenia, bez znateľného zníženia užitkovosti.

1. Všeobecne o salmonelách • EÚ - nové predpisy, účinné opatrenia • kontroly hydinových chovov • zlepšenie laboratórnej diagnostiky. • pokles počtu ochorení salmonelózou u ľudí • dominantným sérotypom je naďalej S. Enteritidis nasledovaná S. Typhimurium.

2. Diagnostika salmonel • rovnaké diagnostické metódy • v súlade s predpismi EÚ • STN EN ISO 6579

2. Diagnostika salmonel STN EN ISO 6579 • Predpomnoženie: 25 g vzorky sa vloží do 225 ml predpomnožovacieho média BPW (tlmivá peptónová voda) a inkubuje sa pri 37 oC 18 hodín • Množenie 0,1 ml predpomnožovacieho média sa pridá do 10 ml RVS (tekuté médium podľa Rappaport-Vasiliadisa), inkubuje sa 24 hod pri teplote 41,5 oC

2. Diagnostika salmonel STN EN ISO 6579 10 ml MKTTn (Muller-Kaufmannovo médium s tetrathionátom a novobiocínom), inkubuje sa 24 hod pri teplote 37 oC • Izolácia Na dve selektívne médiá -deoxycholátové médium so xylózou a lyzínom (XLD) inkubuje sa 24 hod pri teplote 37 oC - ďalšie tuhé selektívne médium podľa výberu (napr. McConkey, Endo agar)

2. Diagnostika salmonel STN EN ISO 6579 • Subkultivácia Suspektné kolónie sa subkultivujú na 2 pevné selektívne médiá

2. Diagnostika salmonel STN EN ISO 6579 • Identifikácia Nasleduje Biochemické (pestrá rada) a sérologické testovanie (aglutinácia)

2. Diagnostika salmonel STN EN ISO 6579-modifikácia • Predpomnoženie: 25 g vzorky sa vloží do 225 ml predpomnožovacieho média (tlmivá peptónová voda) a inkubuje sa pri 37 oC 18 hodín • Množenie MSRV (modifikované polotuhé Rappaportovo Vasiliadisovo médium) misky sa naočkujú 3 kvapkami inkubovanej BPW kultúry. inkubátor 24 h pri teplote 41,5 °C

2. Diagnostika salmonel STN EN ISO 6579-modifikácia Metóda je založená na princípe pohyblivosti salmonel narastajúce prstence okolo naočkovaných škvŕn. Prstence sú charakteristické bielou usadeninou so svetlým okrajom.

2. Diagnostika salmonel STN EN ISO 6579-modifikácia • Pozitívna a negatívna reakcia

2. Diagnostika salmonel STN EN ISO 6579-modifikácia Použitie dôkaz baktérií rodu Salmonella v: – živočíšnych výkaloch (od hydiny, ošípaných, dobytka); – environmentálnych vzorkách z priestorov prvovýroby (typu prach). pri všetkých prebiehajúcich ozdravovacích programoch a štúdiách prevalencie salmonel.

Sledovanie salmonel v hydine Výsledky vyšetrenia salmonel v reprodukčnýchkŕdľoch kury domácej: Celkovo bolo vyšetrených 1 545 jednotiek, v ktorých boli zistené salmonely v 6 jednotkách s prevahou S. Enteritidis. V ostatných chovoch hydiny bolo celkom vyšetrených 6 327 vzoriek kŕdľov s nálezom salmonel v 190 vzorkách (1,9 %) s prevahou S. enteritidis. Z ostatných sérovarov bola najčastejšia S. Kentucky a S. Saintpaul.

3. Sledovanie salmonel v hydine V rokoch 2005-2006 prebiehala Základná štúdia prevalencie salmonel v chovoch broilerov Gallus gallus na základe Rozhodnutia Komisie 2005/636/ES z 1. septembra 2005 na základný prieskum prevalencie Salmonelly spp. u broilerových kŕdľov Gallus gallus, ktoré sa vykonajú v členských štátoch

Sledovanie salmonel v hydine Štúdia ukázala, že v rámci štúdie bolo testovaných 239 kŕdľov, z toho bolo 21 pozitívnych, čo je 8,78 % prevalencia, s prevahouS.Enteritidis (6,2 %), na druhommieste S. Kentucky (1,67 %).

Sledovanie salmonel v hydine A od 1. októbra 2006 sa začali ďalšie štúdie prevalencie salmonel v chovoch moriek, ktoré trvajú do októbra tohto roku. Štúdie sa vzťahujú na reprodukčné chovy a na úžitkové chovy (výkrm) moriek: Počas prvých troch mesiacoch prieskumu bolo vyšetrovaných 15 chovných zariadení s 10 pozitívnymi nálezmi. Sérovary izolované v tomto období boli S.Saint-paula S. kiambu.

3. Sledovanie salmonel v hydine (2006)

3. Sledovanie salmonel v hydine • Vzorky morčacieho mäsa a kačacieho mäsa vrátane mäsových výrobkov • vyšetrených 59, bez nálezu salmonel.

Ďakujem Vám za pozornosť

Aktuálne informácie z laboratórneho vyšetrovania