1 / 9

B ckerhefe und Zellalterung

Zelltod und Altern von Hefezellen. Bckerhefe (Saccharomyces cerevisiae) wird in einem geeigneten Kulturmedium angezchtet. Das Sterben von einzelnen Hefezellen kann ber mehrere Verfahren bestimmt werden:berlebensplattierungFACS-Analyse. FACS=Fluoreszenz-Aktivierter-Zell-SortiererFluoreszen

nemesio
Télécharger la présentation

B ckerhefe und Zellalterung

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

    1. Bckerhefe und Zellalterung Hefezellen sind eukaryonte einzellige Pilze und vermehren sich in Kulturen sehr rasch. Die Bckerhefe dient fr viele Vorgnge auf zellulrer Ebene als Modellorganismus. So kann die Entstehung von Krebs oder aber auch das Altern und der Zelltod in der Hefe untersucht werden.

    2. Zelltod und Altern von Hefezellen Bckerhefe (Saccharomyces cerevisiae) wird in einem geeigneten Kulturmedium angezchtet. Das Sterben von einzelnen Hefezellen kann ber mehrere Verfahren bestimmt werden: berlebensplattierung FACS-Analyse. FACS=Fluoreszenz-Aktivierter-Zell-Sortierer Fluoreszenz-Mikroskopie Im Kurs werden die Daten aus der FACS-Analyse mit den Resultaten der Fluoreszenz-Mikroskopie verglichen

    3. berlebensplattierung. Eine Anzahl von genau 500 Zellen (diese werden zuvor mit einem Zellzhlgert gezhlt) aus der Kultur wird auf einer Agarplatte ausgebracht. Die entstehenden Kolonien werden als noch lebende Zellen aus den ursprnglich 500 gezhlt. Zum Beispiel 250 Kolonien auf der Platte = 50% berleben.

    4. FACS-Analyse Hefezellen werden einer Kultur zu einem bestimmten Zeitpunkt entnommen und mit einem Fluoreszenzfarbstoff gefrbt. DHE (Dihydroethidium) Frbung zum Nachweis von reaktiven Sauerstoff-Spezies (z.B.: H2O2) in den Zellen. Zellstress wird so nachgewiesen. DHE positive Zellen sind solche, die Apoptose betreiben (Aktiver Zell-Selbstmord) TUNEL Frbung zum Nachweis der DNA-Fragmentierung im Zellkern. TUNEL positive Zellen sind solche, die Apoptose betreiben.

    5. DHE-Frbung (FACS Analyse)

More Related