1 / 39

Mikroskopia i techniki wizualizacji

Mikroskopia i techniki wizualizacji. Milena Damulewicz Zakład Cytologii i Histologii Uniwersytet Jagielloński. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/wavebasics/index.html. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/lenses/converginglenses/index.html

ronia
Télécharger la présentation

Mikroskopia i techniki wizualizacji

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Mikroskopia i techniki wizualizacji Milena Damulewicz Zakład Cytologii i Histologii Uniwersytet Jagielloński

  2. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/wavebasics/index.htmlhttp://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/wavebasics/index.html

  3. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/lenses/converginglenses/index.htmlhttp://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/lenses/converginglenses/index.html http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/lenses/diverginglenses/index.html

  4. optyka

  5. ABERRACJA SFERYCZNA Wiązki światła symetryczne względem osi optycznej i różnie od niej oddalone, po przejściuprzez układ nie przecinają się w jednym punkcie http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/aberrations/spherical/index.html

  6. ABERRACJA CHROMATYCZNA Wada soczewkowych układów optycznych spowodowana zależnością współczynnika załamaniaświatła materiału soczewek od długości fali świetlnej; przejawia sięw powstawaniu na obrazie barwnych obwódekwskutek rozszczepienia światła przy załamaniu w materiale soczewki. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/aberrations/chromatic/index.html

  7. KOMA Wiązka promieni świetlnych, wychodząca z punktu położonego poza osią optyczną, tworzy po przejściu przez układ plamkę w kształcie przecinka; ujawnia się tym bardziej, im dalej punkt leży od osi. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/aberrations/coma/index.html

  8. Astygmatyzm Obraz punktu położonego poza osią optyczną układu nie tworzy punktu, lecz dwie linie ogniskowe, z których jedna leży w płaszczyźnie padania, obejmującej oś soczewkii przedmiotpunktowy, a druga jest do tej płaszczyzny prostopadła. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/aberrations/astigmatism/index.html

  9. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/microscopy/transmitted/index.html http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/kohler/condenseraperture/index.html

  10. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/microscopy/transmitted/index.html

  11. Zdolność rozdzielcza mikroskopu 0,61 l L = NA NA = n sinm

  12. http://www.microscopy.fsu.edu/primer/java/nuaperture/index.html

  13. Powiększenie mikroskopu L D M = f1 f2 L – mechaniczna długość tubusa D – odległość dobrego widzenia (250 mm) f1 – ogniskowa obiektywu f2 – ogniskowa okularu

  14. Przysłona aperturowa

  15. Typy mikroskopów • Mikroskop świetlny • Jasnego pola • Ciemnego pola • Kontrastu fazowego • Interferencyjny • Polaryzacyjny • Fluorescencyjny • Elektronowy • Skaningowy • transmisyjny • Konfokalny

  16. Mikroskop jasnego i ciemnego pola www.precoptic.pl

  17. Mikroskop interferencyjny • Kontrast Nomarskiego • Analiza ilościowa suchej masy • Określenie grubości skrawków • Optyczne „wybarwienie” • Plastyczny obraz

  18. Mikroskop fluorescencyjny • Filtr wzbudzenia • Filtr absorbujący • Filtr barierowy

  19. Mikroskop konfokalny

  20. Mikroskop elektronowy skaningowy

  21. TEM

  22. Metody wizualizacji • Barwienie przyżyciowe • Barwienie histologiczne • Barwienie histochemiczne • Barwienie immunohistochemiczne • Barwienie fluorescencyjne • Barwienie immunofluorescencyjne • Barwienie radioimmunoizotopowe • Barwienie enzymatyczne • GFP

  23. Preparaty parafinowe Utrwalenie tkanek – formalina Odwodnienie Przepojenie Zatopienie w parafinie Skrawanie Odparafinowanie Nawodnienie barwienie Preparaty mrożeniowe Krioprotekcja Utrwalenie w ciekłym azocie Skrawanie barwienie Przygotowanie materiału

  24. Kontrastowanie struktur komórkowych Hematoksylina + eozyna fiolet krystaliczny Barwienie histologiczne

  25. Barwienie histochemiczne • Uwidocznienie określonych substancji w komórce • PAS = z odczynnikiem Schiffa – wykrywa cukry

  26. Barwienie immuno- Przeciwciało drugorzędowe znacznik Przeciwciało Przeciwciało pierwszorzędowe

  27. Barwienie immunohistochemiczne • Wykrywanie antygenów za pomocą znakowanych przeciwciał

  28. Barwienie radioimmunoizotopowe • Tryt • Jod 125 • Fosfor 32 • Fosfor 33 • Siarka35 • Węgiel 14

  29. Barwienie enzymatyczne • Peroksydaza chrzanowa • Alkaliczna fosfataza

  30. Barwienie fluorescencyjne • DiIC18 – błona komórkowa • Hoechst –DNA – niebieskie • DAPI • Oranż akrydyny – DNA zielone; RNA pomarańczowe

  31. Barwienie immunofluorescencyjne • FITC • Texas red • Cy3 • rodamina

  32. GFP www.greenspine.ca/en/GFP_neuron.html

  33. Oświetlenie Kohlera • Kondensor przesuwamy pod stolik • Ustawiamy ostro widziany preparat • Zamykamy przesłonę polową i aperturową • Ustawiamy na środku plamkę światła • Ustawiamy ostre brzegi plamki • Rozszerzamy plamkę do granic pola widzenia • Ustawiamy włókna żarówki centralnie

More Related