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MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS. MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS. AIDA ELIANETH BERNABÉ MALDONADO 205206. TITULAR: DR. IVÁN SALMERON OCHOA. MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS. DETECCIÓN. RECUENTO. MICROORGANISMOS. CARACTERIZACIÓN. SUBTIPIFICACIÓN.
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MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS AIDA ELIANETH BERNABÉ MALDONADO 205206 TITULAR: DR. IVÁN SALMERON OCHOA
MÉTODOS RÁPIDOS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS DETECCIÓN RECUENTO MICROORGANISMOS CARACTERIZACIÓN SUBTIPIFICACIÓN
MÉTODOS RÁPIDOS • Películas de medios de cultivo deshidratados generales o selectivos. FISICO-QUÍMICAS • Medios cromogénicos y fluorogénicos • Enzimoinmunoensayo • Aglutinación • Radioinmunoensayo INMUNOLÓGICAS • Inmunocromatografía • Citometría
MÉTODOS RÁPIDOS • Hibridación • PCR • Biochips MOLECULARES • Galerías miniaturizadas y automatizadas BIOQUÍMICAS
FILM HIDRATABLE: PETRIFILM: 3M Películas de medios de cultivo deshidratados generales o selectivos. • Optimizan el espacio de incubación • Manual • Posibilidad de lector automático • Validaciones internacionales • Recuento total: • Enterobacterias • E.coli/Coliformes • Mohos y levaduras • Staphylococcusaureus • Listeria ambiental
Medios cromogénicos y fluorogénicos Colonias violetas, Mucosas. Fluorescencia amarillo-verdosa FLUOROGÉNICOS • Orientación • Selectivos CROMOGÉNICOS Para la realización de estas técnicas el anticuerpo se marca con un fluorocromo detectándose la formación del complejo Ag-Ac por la fluorescencia emitida.
MÉTODOS CROMOGÉNICOS • VENTAJAS. • Eliminan la necesidad del subcultivo • Eliminan la elaboración de numerosas pruebas bioquímicas economizando tiempo y dinero. • DESVENTAJAS: • La actividad enzimática de los microorganismos • Interpretación de los colores por parte del operador. Sin embargo con respecto a esto último se han desarrollado equipos que facilitan la lectura de las placas.
citometría • Mide las características de dispersión de luz y fluorescencia que poseen las células conforme se las hace pasar a través de un rayo de luz. • Al atravesar el rayo de luz, las células interaccionan con este causando dispersión de la luz, puede evaluar el tamaño de las células. Para la realización de estas técnicas el anticuerpo se marca con un fluorocromo detectándose la formación del complejo Ag-Ac por la fluorescencia emitida.
PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) • Método para detectar número extremadamente bajo de microorganismos, con una cierta rapidez basado de la producción de copias de genes específicos de un microorganismo en cuestión.
aglutinación • Cuando el antígenos se encuentra unido o formando parte de células, bacterias o partículas, la reacción Ag-Ac se puede detectar y cuantificar por el aglutinado celular o bacteriano formado.
radioinmunoensayo • En esta técnica el anticuerpo se une un isótopo radiactivo siendo posible la cuantificación del complejo Ag-Ac a través de la radiactividad emitida.
biochip • Es un aparato capaz de realizar rápidas reacciones bioquímicas en escala reducida, con el propósito de identificar secuencias genéticas, agentes contaminantes, toxinas, bacterias. • .
ENZIMOINMUNOENSAYO • Esta técnica, también se conoce como ensayo de ELISA (Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay). La identificación de los complejos Ag-Ac, se hace mediante el empleo de enzimas, bien unidas al antígeno, o bien unidas al anticuerpo.
Galerías miniaturizadas y automatizadas • Desarrollo algunos medios de cultivo selectivos • Metabolismo de sustratos específicos • Detección por sistemas indicadores • Ventajas: • Reducción de volumen de reactivos y medio a emplear en los ensayos • Rapidez en la obtención de resultados • Posibilidad de lectura e interpretación de resultados de manera automatizada
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS • http://www.madrimasd.org/blogs/alimentacion/2008/02/08/84070 • http://multimedia.3m.com/mws/mediawebserver?mwsId=66666UuZjcFSLXTtMxMy4xTtEVuQEcuZgVs6EVs6E666666--&fn=HSCC%20Interp%20Guide_sp.pdf • http://gotasmicrobiologicas.blogspot.mx/2011/02/medios-cromogenicos.html • http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12-metodos%20de%20recuento.htm • http://www.in-enologia-veritas.com/old/docs/Microbio.pdf • http://www.finagro.com.co/html/cache/HTML/SIS/FOODSAFETY/LinaCarolinaCruz-DiagnosticoMicrobiologico.pdf
Aida elianethbernabémaldonado GRACIAS