DIAGÓSTICO DE HIV

1.  DIAGÓSTICO DE HIV LIC. RICARDO SALDAÑA

2.  PRUEBAS DE LABORATORIO • Métodos Directos: Evidencian/cuantifican la presencia de antígenos en la muestra. • PCR cualitativa, • PCR cuantificada • cultivo y aislamiento viral, • antigenemia P-24) Por: Lic. Ricardo Saldaña

3.  PRUEBAS DE LABORATORIO • Métodos Indirectos: • Evidencian la presencia o ausencia de anticuerpos totales en la muestra. • Son los más utilizados. • Pruebas rápidas • ELISA Por: Lic. Ricardo Saldaña

4.  Diagnóstico de VIH Se usan dos niveles de prueba serológicas: • Pruebas de Tamizaje: • Ensayos inmunoenzimáticos • Test de aglutinación • Test de detección rápida • Tienen alta sensibilidad. • La posibilidad de tener falsos negativos es bajo. Por: Lic. Ricardo Saldaña

5.  Pruebas rápidas disponibles en el mercado Multispot HIV-1/HIV-2 Uni-Gold Recombigen OraQuick Advance Reveal G2 Por: Lic. Ricardo Saldaña

6.  Ventajas de las pruebas rápidas de VIH • Versatilidad y existencia de diferentes principios inmunológicos así como en las muestras biológicas que se pueden utilizar. • No necesitan un laboratorio muy sofisticado para utilizarlas. • La realización y la interpretación de los resultados obtenidos es fácil. • Los resultados preliminares se obtienen en poco tiempo, y cuando se combinan los resultados definitivos los podemos obtener en menos de una hora • Personal a nivel técnico las puede realizar con la debida capacitación y supervisión de un profesional con experiencia. Por: Lic. Ricardo Saldaña

7.  Fortalezas de las pruebas rápidas de VIH • Algunas se pueden almacenar a temperatura ambiente. • Se optimiza el uso de los recursos y el tiempo comparado con el ELISA. • Los resultados obtenidos son igual de confiables que los resultados del ELISA y con menos limitaciones técnicas. • Algunas requieren poca inversión económica. Por: Lic. Ricardo Saldaña

8.  Debilidades de las pruebas rápidas de VIH • El costo comparado de estas pruebas con el ELISA puede a veces ser mayor. • Presencia de falsos positivos por lo que necesitan confirmación de los resultados obtenidos. • El periodo de ventana es mas largo por lo que podemos tener resultados falso negativo comparado con el ELISA de cuarta generación. Por: Lic. Ricardo Saldaña

9.  Causas de resultado falso-positivo: • Relativas al suero: • Relativo a la calidad y manipulación de la muestra: • Calidad, extracción, almacenamiento y contaminación de la misma, estabilidad y calidad de los reactivos. • Relativas a la presencia de auto anticuerpos: • Presencia de enfermedades autoinmunes (AR, LES). • Relativas a otras condiciones: • Vacunaciones, Enf. Virales, I Renal, Cirrosis, Enfermedades hemato -oncológicas, alcoholismo, embarazo, etc. Por: Lic. Ricardo Saldaña

10.  Causas de resultado falso- negativo: • Periodo de ventana • Tratamiento con inmunosupresores • Procesos malignos • Trasplante de médula ósea • Disfunciones de las Células B • Factores reumatoides • Pérdida de estabilidad de los reactivos • Reactivos que detectan principalmente p24 • Pobre respuesta inmune Por: Lic. Ricardo Saldaña

11.  Selección de pruebas rápidas de VIH apropiadas • Es necesario tomar en cuenta tres factores: • El objetivo de hacer la prueba. • Sensibilidad y especificidad de la prueba. • Prevalencia de la infección de VIH en la población que será tamizada con las pruebas. Por: Lic. Ricardo Saldaña

12.  Elección de Pruebas rápidas de VIH • Los tres objetivos para hacer un tamizaje de anticuerpos contra VIH son: • Tamizaje de donadores de sangre u órganos. • Para fines epidemiológicos • Diagnóstico de personas infectadas. Por: Lic. Ricardo Saldaña

13.  Sensibilidad y especificidad de la prueba • Estos dos factores son críticos para diferenciar entre una persona infectada y una que no está infectada. • Pruebas alta mente sensibles disminuyen la posibilidad de obtener resultados falsos negativo. • Las pruebas altamente específicas disminuyen la posibilidad de tener resultados falsos positivo. • La mejor elección dependerá del objetivo de hacer la pruebas. • Los estándares mínimos son: Sensibilidad >99% y especificidad >95% preferiblemente validadas en nuestra población. Por: Lic. Ricardo Saldaña

14.  Sensibilidad y especificidad de las pruebas Resultados De la prueba Sensibilidad = a / (a + c) Especificidad = d / (b + d) VPP = a / (a + b) VPN = d/ (c + d) Por: Lic. Ricardo Saldaña

15.  Detección de anticuerpos contra el VIH Pruebas de Tamizaje Pruebas de Confirmación Sensibilidad Especificidad Falsos positivos es bajo Falsos negativos es bajo Por: Lic. Ricardo Saldaña

16.  Prevalencia de la infección de VIH • Definición: Casos positivos * 100% población total • La prevalencia puede variar de población a población o en un hospital de servicio a servicio. • A > prevalencia > VPP y < VPN • A > prevalencia > VPN y > VPP Por: Lic. Ricardo Saldaña

17.  Bioline VIH ½ 3.0Estándar Diagnostic • Principio: Análisis Inmunocromatográfico • Prueba de 3ra. generación • Interpretación:Visual • Muestras: Suero, plasma y sangre (EDTA) • Volumen de muestra:10µl • Tiempo:20 minutos • Sensibilidad: 100.0% • Especificidad: 99.4% Por: Lic. Ricardo Saldaña

18.  Pruebas de laboratorio Instanscreen Oraquick Determine Por: Lic. Ricardo Saldaña

19.  DETERMINE: Prueba rápidaCaracterísticas: • Principio: Análisis Inmunocromatográfico • Interpretación:Visual • Muestras: Suero, plasma y sangre (EDTA) • Volumen de muestra:50µl • Tiempo:30-35 minutos • Sensibilidad: 99.6% • Especificidad: 99.4% Por: Lic. Ricardo Saldaña

20.  Immunocomb IICaracterísticas: • Principio: Ensayo inmunoenzimático Indirecto. • Interpretación:Visual • Muestras: suero y plasma • Volumen:50µl • Tiempo: 60 minutos • Sensibilidad: 100% • Especificidad: 99.4% • No necesita equipo automatizado Por: Lic. Ricardo Saldaña

21. ORAQUICKCaracterísticas • Principio: Análisis Inmunocromatográfico • Interpretación:Visual • Muestras: Suero, plasma y sangre completa y fluído oral. • Tiempo:30-35 minutos • Sensibilidad: 99.6% • Especificidad: 99.4% Por: Lic. Ricardo Saldaña

22.  PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS Por: Lic. Ricardo Saldaña

23.  Muchas Graciaspor su atención.