Decision Limit & Detection Capability

1. Decision Limit & Detection Capability

2. CCa & CCb

3. Negative Positive Non-Compliant <----> Compliant

4. Banned substances • Zero tolerance • Not detectable • Detection Limits ขึ้นอยู่กับวิธีทดสอบที่ใช้ • ซึ่งแตกต่างกันในแต่ละห้องปฏิบัติการ • จึงมีการกำหนดมาตรฐานเป็นค่า Minimum • Required Performance Limit = MRPL

5. Banned substances • วิธีทดสอบของห้องปฏิบัติการจะต้องสามารถทดสอบที่ระดับ MRPLได้ • ตัดสินว่าผลิตภัณฑ์ Non-compliant เมื่อความเข้มข้นของสารในตัวอย่าง > CCa • ที่ระดับความเชื่อมั่น 99 %

6. New analytical limits: X CCa - Decision Limit Limit of detection X CCb - Detection Capability Limit of quantification

7. CCและ CC • CC มาจาก critical concentration • มาจาก alpha error • เป็นความผิดพลาดเนื่องจากตรวจพบ banned drug ในตัวอย่าง ทั้งที่จริงๆแล้วไม่มี banned drug ในตัวอย่าง False positive result

8. CCและ CC • มาจาก beta error • เป็นความผิดพลาดเนื่องจากตรวจไม่พบ banned drug ในตัวอย่าง ทั้งที่จริงๆแล้วมี banned drug ในตัวอย่าง False negative result

9. CCและ CC • นำมาใช้ในการตัดสินตัวอย่างว่าผ่านมาตรฐานหรือไม่ โดยประเมินความเข้มข้นที่ตรวจพบในตัวอย่างเทียบกับ CCและ CC

10. a- and ß-errors for banned compounds a-error = 1 % b-error = 5 %

11. CCa ความเข้มข้นที่ทำให้เกิดความผิดพลาดเท่ากับ  ในการตรวจพบสารในตัวอย่าง

12. ทดสอบ blank หลายๆ ซ้ำ ได้ค่า responsesต่างๆ Frequency Signal

13. ค่าเฉลี่ยของ response Normal distribution XB Frequency Signal

14. XB ค่าเฉลี่ย + 2.33 SD Frequency a = 1 % CCa Signal

15. XB blank samples จำนวน 1% ที่ให้ผลทดสอบมีค่า > CCa Frequency CCa Signal

16. XB ซึ่งเป็น false positive results (> Zero) = a-Error = 1% Frequency CCa Signal

17. Decision Limit - banned substances CCมีค่ามากกว่า 0 และน้อยกว่า MRPL

18. XB Frequency CCa Signal

19. ตัวอย่างที่มีความเข้มข้นเฉลี่ย = CCa Frequency CCa Signal

20. 50 % ตรวจไม่พบสาร Frequency CCa Signal

21. 50 % ตรวจพบสาร Frequency CCa Signal

22. Banned substances ที่ความเข้มข้น CC False negative rate = 50%

23. ถาม: ที่ความเข้มข้นของ banned drug เท่าไรที่มั่นใจได้ 95% ว่าผลทดสอบตัวอย่างไม่ผ่านมาตรฐาน ตอบ: ที่ความเข้มข้น Detection Capability (CCb)

24. CCb-banned substance ความเข้มข้นที่วิธีทดสอบสามารถตรวจพบ banned drug ได้อย่างแท้จริง โดยมีความมั่นใจ 95%

25. Frequency CCa Signal

26. < 50 % ตรวจไม่พบสาร Frequency CCa Signal

27. << 50 % ตรวจไม่พบสาร Frequency CCa Signal

28. 5 % ตรวจไม่พบสาร = false negative results Frequency CCa CCb Signal

29. Banned substances ที่ความเข้มข้น CCb False positive rate = น้อยมากๆ False negative rate = 5% (และ CCbจะต้อง < MRPL)

30. การหาค่า CCa และ CC-banned drug • สามารถทำได้ 2 วิธี • 1. ทดสอบ fortified sample blank 3 ความเข้มข้นหรือ • 2. ทดสอบ sample blank

31. การหาค่า CCa- วิธีที่ 1 • Fortify negative matrix ที่ความเข้มข้น • 1.0, 1.5 และ 2 เท่าของ MRPL • ทดสอบแต่ละความเข้มข้น7 ซ้ำ • ทดสอบเช่นนี้อีก 2 ครั้ง ในวันที่แตกต่างกัน • เขียนกราฟระหว่าง signal (แกน Y) กับความ • เข้มข้นที่ fortify (แกน X)

32. S.D. of the within-laboratory reproducibility    1.0 x MRPL 1.5 x MRPL 2.0 x MRPL Calibration line Signal

33.  คำนวณ SE ของ intercept Calibration line  Signal  1.0 x MRPL 1.5 x MRPL 2.0 x MRPL

34. คูณ SE ด้วย 2.33 (1%, one sided)  Calibration line  Signal  1.0 x MRPL 1.5 x MRPL 2.0 x MRPL

35. Intercept + (2.33 x SEInt) CCa CCaคือความเข้มข้นที่ได้จาก signal ที่มีค่าเท่ากับ (Intercept) + (2.33 x SE of the within laboratory reproducibility of the intercept) CCa= ( 2.33SEintercept ) / slope  Calibration line  Signal  1.0 x MRPL 1.5 x MRPL 2.0 x MRPL

36. การหาค่า CCb – วิธีที่ 1 • Fortify negative matrix ที่ความเข้มข้นน้อยกว่าและเท่ากับ MRPL โดยแบ่งช่วงห่างเท่าๆ กัน • เขียนกราฟระหว่าง signal (แกน Y) กับความเข้มข้นที่ fortify (แกน X) • CC = ( 2.33SEintercept + 1.64SECC ) / slope

37. Signal at CCa + 1.64 x SE ของ W/L reproducibility at CCa CCb CCbคือความเข้มข้นที่ได้จาก Signalที่มีค่าเท่ากับ (signalของ CCa) + (1.64 x SE ของ W/L reproducibility at CCa)  Calibration line  Signal  CCa 0.33 x MRPL 0.66 x MRPL 1.00 x MRPL

38. การหาค่า CCa- วิธีที่ 2 • ทดสอบ sample blank  20 ซ้ำ • คำนวณ S : N ratio • CCaเท่ากับ 3 เท่าของ S : N ratio

39. การหาค่า CCb – วิธีที่ 2 • ทดสอบ fortified sample blank ที่ความ • เข้มข้นเท่ากับ CCa  20 ซ้ำ • CCb = CCa + 1.64 S.D.

40. การหาค่า CCและ CCb – วิธีที่ 3 • ทดสอบ sample blank 20 ซ้ำ คำนวณค่าเฉลี่ยของ response( n) และ SDของ response (SDn) • ทดสอบ fortified sample blank 21 ซ้ำคำนวณ RSD ของ response (RSDs) • slope จาก calibration curve = a

41. การหาค่า CCและ CCb – วิธีที่ 3 • CC = 2.33 (SDn) / a • CC = 2.33 (SDn) + 1.64 (n) (RSDs) • a [ 1 – 1.64 (RSDs) ]

42. } } > MRPL < MRPL ตรวจสอบวิธีทดสอบที่ใช้ว่าสามารถทดสอบ ที่ระดับ MRPL (หรือต่ำกว่า) ได้หรือไม่ • Chloramphenicol (MRPL = 0.3 µg/kg) • ทดสอบ sample blank และ fortified sample blank ที่ความเข้มข้นต่างๆ ดังนี้ 0.10, 0.20, 0.30, 0.45, 0.60 µg/kg

43. ตรวจสอบวิธีทดสอบที่ใช้ว่าสามารถทดสอบตรวจสอบวิธีทดสอบที่ใช้ว่าสามารถทดสอบ ที่ระดับ MRPL (หรือต่ำกว่า) ได้หรือไม่ • ทดสอบแต่ละความเข้มข้น7 ซ้ำ • ทดสอบเช่นนี้อีก 2 ครั้ง ในวันที่แตกต่างกัน • ตรวจสอบ accuracy และ precision

44. ผลกรณีที่ 1 Q. What is CCß? A. < 0.1 µg/kg

45. ผลกรณีที่ 1 Q. Is method fit-for-purpose? A. Yes. CCb is less than MRPL.

46. ผลกรณีที่ 2 Q. What is CCß? A. ~0.20 µg/kg

47. ผลกรณีที่ 2 Q. Is method fit-for-purpose? A. Yes. CCb is less than MRPL.

48. ผลกรณีที่ 3 Q. What is CCß? A. 0.30 - 0.45 µg/kg

49. ผลกรณีที่ 3 Q. Is method fit-for-purpose? A. No. CCb is greater than MRPL.

50. Licensed substances • กำหนดมาตรฐานเป็นปริมาณตกค้างสูงสุดใน • ผลิตภัณฑ์ ( Maximum Residue Limit = MRL ) • วิธีทดสอบของห้องปฏิบัติการจะต้องสามารถทดสอบ • ที่ปริมาณ MRL ได้ • ตัดสินว่าผลิตภัณฑ์ Non-compliant เมื่อความเข้มข้นของสารในตัวอย่าง > CCa • ที่ระดับความเชื่อมั่น 95 %