1 / 59

Mikroorganismu gēnu inženierija

Mikroorganismu gēnu inženierija. 20 13 ./20 14 . mācību gada 2. semestris. GI drošība . GI eksperimentu drošības jautājums tiek aktualizēts 70-to gadu sākumā .

kenny
Télécharger la présentation

Mikroorganismu gēnu inženierija

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Mikroorganismu gēnu inženierija 2013./2014. mācību gada 2. semestris Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  2. GI drošība • GI eksperimentu drošības jautājums tiek aktualizēts 70-to gadu sākumā Vai rekombinantās molekulas, kurās notiek svešas DNS (it īpaši onkogēno vīrusu DNS) savienošana ar baktēriju plazmīdām, kas satur antibiotiku rezistences gēnus, var nekontrolējami izplatīties un būt bīstamas? Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  3. GI drošība 1973. - 1974. gadā vairāki zinātnieki (tai skaitā Paul Berg) izsaka bažas par GI eksperimentu potenciālo bīstamību un ierosina zinātniekus brīvprātīgi atturēties no dažu eksperimentu veikšanas līdz laikam, kad būs izvērtēta to drošība. Berg et al. (1974). Potential biohazards of recombinant DNA molecules. Science, 185, 303 Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  4. GI drošība 1975. gadā notiek Asilomaras konference (CA, USA), kurā 150 zinātnieki, kas veic GI eksperimentus vienojas, ka jāievēro piesardzība un jāatturas no noteiktu eksperimentu veikšanas Berg et al. (1975). Asilomar conference on recombinant DNA molecules. Science, 188, 991-994 Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  5. GI drošība • NIH izveido rekombinanto DNS molekulu programmas padomdevēju komiteju, kas izstrādā detalizētus noteikumus darbam ar rekombinanto DNS Par pamatu tiek ņemti mikrobioloģisko pētījumu drošības pasākumu principi un līmeņi. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  6. GI drošība Aizsardzības principi • Primārā aizsardzība: Droša un atbilstoša: aparatūra, trauki, telpu iekārtojums, laboratorijas apģērbs, higēnas pasākumi, līdzstrādnieku vakcinēšana. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  7. GI drošība Aizsardzības principi • Sekundārā - vides aizsardzība: Izlietoto un nevajadzīgo materiālu dezinfekcija, sadedzināšana, ķīmiska likvidēšana, gaisa, ūdeņu apmaiņas kontrole. Noliegums laboratorijās atrasties nepiederošām personām. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  8. BSL Tiek ieteikti 4 drošības līmeņi vai klases: • BSL1 - drošiem eksperimentiem • BSL2 - zemas bīstamības eksperimentiem • BSL3 - vidējas bīstamības eksperimentiem • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  9. BSL I • BSL1 - drošiem eksperimentiem mikroorganismiem, kuri - cilvēkiem slimības neizraisa un - nav agresīvi epidēmiju izraisītāji augu un dzīvnieku valsts pārstāvjiem, piemēram, Escherichia coliK-12 līnijas atvasinājumi. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  10. BSL I • BSL1 - drošiem eksperimentiem Laboratorijā ievēro vispārējos ķīmijas un mikrobioloģijas noteikumus, tā nav speciāli jānodala no citām telpām, cilvēku iekļūšana nedaudz ierobežota. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  11. BSL I • BSL1 - drošiem eksperimentiem Ja nav jābaidās no paraugu piesārņošanas ar apkārtējiem mikroorganismiem, - var strādāt uz atklātas galda virsmas, - kuru pēc darba notīra, - piesārņojuma gadījumā dezinficē. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  12. BSL I • BSL1 - drošiem eksperimentiem Šim līmenim vajadzētu atbilst jebkurai augstskolas laboratorijai. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  13. BSL II • BSL2 - zemas bīstamības eksperimentiem - Nosacīti patogēni mikroorganismi, vai - patogēni mikroorganismi, - kuru izplatībai nepieciešami īpaši nosacījumi, - un pret kuriem ir vakcīnas, - un kuru radītās slimības veiksmīgi ārstējamas. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  14. BSL II • BSL2 - zemas bīstamības eksperimentiem Šajās laboratorijās veic - patogēnu noteikšanu, - tos pavairot lielā skaitā nav vēlams. Šī līmeņa laboratorijās analizējams potenciāli infekciozais, klīniskais materiāls. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  15. BSL II • BSL2 - zemas bīstamības eksperimentiem - Piekļūšana laboratorijas telpām ir ierobežota, - tām jābūt apzīmētām ar zīmi “Bioloģiski bīstams”, - darbinieki augstākas kvalifikācijas, sertificēti darbam ar bīstamiem mikroorganismiem, - īpaša apstrāde izlietotajiem, asajiem materiāliem. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  16. BSL II • BSL2 - zemas bīstamības eksperimentiem Ar dzīviem mikroorganismiem vai tos saturošiem paraugiem jāstrādā laminārās plūsmas skapjos, kuros gaisa plūsma vērsta uz iekšu. Šim līmenim pieder visas medicīniskās mikrobioloģijas laboratorijas. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  17. BSL III • BSL3 - vidējas bīstamības eksperimentiem Strādā ar mikroorganismiem, - kuri izraisa nopietnas slimības, - lielas ekspozīcijas gadījumā var būt letāls iznākums, - taču ir zināmas metodes izraisīto slimību ārstēšanai, pieejamas vakcīnas. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  18. BSL III • BSL3 - vidējas bīstamības eksperimentiem Dažos gadījumos izvēlas BSL-3 laboratorijas darbam ar mazāk bīstamiem patogēniem, - ja tie eksperimentu gaitā var atrasties aerosola formā un tāpēc vieglāk nokļūt plaušās. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  19. BSL III • BSL3 - vidējas bīstamības eksperimentiem Mikroorganismu piemēri: - Rietumnīlas vīruss - saslimšana ļoti smaga, bet to pārnēsā insekti, tas neizplatās ar aerosoliem, netīrām rokām). Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  20. BSL III • BSL3 - vidējas bīstamības eksperimentiem - Laboratorijas durvīm vienmēr jābūt aizvērtām, - logi ir hermētiski noslēgti, - strādājošajiem jālieto: - apavu virsvalki, - aizsargbrilles, - cimdi, ķirurģiskie halāti, - marles aizsargmaskas vai respiratori. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  21. BSL III • BSL3 - vidējas bīstamības eksperimentiem - Laboratorijā tiek uzturēts samazināts gaisa spiediens, - laboratorijas ventilācijai, laminārās plūsmas skapjiem jābūt aprīkotai ar HEPA gaisa filtriem, - telpām un gaisam regulāri veic mikrobioloģiskās pārbaudes, - personāls speciāli apmācīts. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  22. BSL III • HEPA - high efficiency particulate air filter - gaisa filtri, kuri aiztur vismaz 99,97% no daļiņām, kuru diametrs ir 0,3 mikrometri (µm); baktēriju izmēri vidēji 1 - 5 µm vīrusu izmēri 0,02 - 0,3 µm - izveidoti 1940-tajos - kodolpētījumu vajadzībām; Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  23. BSL III • HEPA - high efficiency particulate air filter 1950- tajos sāk plašāk pielietot rūpniecībā: - medicīnā, - farmaceitiskajā, pārtikas, - kodol-, - mikroelektroniskajā, - kosmisko iekārtu … - tagad arī sadzīves iekārtu izgatavošanā. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  24. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem Mikroorganismiem, pēc saskares ar kuriem - izredzes izdzīvot ir mazas, - pret šiem mikroorganismiem parasti nav arī vakcīnu, efektīvu ārstēšanas metožu; - nepazīstamiem patogēniem mikroorganismiem, kuri varētu izrādīties ļoti bīstami. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  25. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem Mikroorganismi parasti viegli izplatās pilien- infekciju veidā. Pēdējā laikā šādās laboratorijās iesaka strādāt ar dziedināmāmu infekcijas slimību izraisītājiem, kuri strauji un viegli izplatās, Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  26. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem - radot epidēmijas vai pandēmijas - cilvēkiem un dzīvniekiem, nodarot lielus zaudējumus tautsaimniecībai. Pie pēdējiem pieskaitāmi dažādu gripu, mutes un nagu sērgas u.c. izraisītāji. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  27. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem - tiek lietots hermē- tisks spectērps (masa ap 9 kg). - Darbinieki sarunājas ar tērpā iemontētu rāciju palīdzību. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  28. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem - Darbinieki (spectērps) pieslēgti gaisa vadam - tie izvietoti ik pa 3,5 m. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  29. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem Laboratorijas izejā atrodas drošības slūžas, kuru - abas durvis hermētiski noslēgtas, - nav atveramas vienlaicīgi. Atstājot laboratoriju, slūžu dušā jāpavada 5 min. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  30. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem Veicamie eksperimenti parasti prasa divreiz vairāk laika, nekā parastos apstākļos. Tas saistīts ar drošības pasākumiem. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  31. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem Laboratorijas veido kā atsevišķas, norobežotas ēkas, vai tās atrodas kopīgas ēkas labi norobežotā un izolētā daļā. Tām ir nodalīta gaisa un ūdens aprites sistēma un autonoma elektroapgāde, lai uzturētu laboratorijas drošību strāvas padeves traucējumu gadījumā. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  32. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem Visi eksperimenti notiek pazemināta spiediena lamināros. Pašā laboratorijā ir samazināts gaisa spiediens. Aizsargtērpos spiediens palielināts. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  33. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem HEPA filtri izvietoti visos gaisa vados, kuri ved uz āru no laboratorijas. Filtrus regulāri maina un attīra no patogēniem. Notekūdeņi pirms izkļūšanas tiek sterilizēti. Uz traukiem, skalpeļiem, adatām un citiem materiāliem esošie patogēni tiek nonāvēti tos autoklāvējot. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  34. BSL IV • BSL4 - augstas bīstamības eksperimentiem Iekļūšana laboratorijā tiek stingri kontrolēta: - pa ceļam jāšķērso vairāki kontroles posteņi. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  35. BSL IV Tikai 4. drošības līmenī atļauts strādāt ar: marburga, ebola, mačupo, guanarito, omskas hemoraģiskā drudža u.c. vīrusiem. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  36. Drošība Centers for Disease National Institutes Control and Prevention (Atlanta) of Health (Maryland) Ieteikumi par dardu dažāda līmeņa laboratorijās apkopoti CDC un NIH izdevumā: “Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories” http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/ Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  37. BSL 3-4 Eiropā (2014) BSL3 (12) BSL4 (8) nākotnē plānotas BSL4 (7) 2014 http://www.enivd.de/hsl.htm Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  38. BSL 3-4 Eiropā (2004) BSL3 (7) BSL4 (7) 2004 Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  39. GI drošība Gēnu inženierijas eksperimentiem bīstamības klase tiek noteikta: pēc DNS donora bīstamības un pēc DNS recipienta bīstamības, ņemot vērā, kādu informāciju satur pārnesamā DNS. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  40. GI drošība Jāuzmanās arī no darba ar audu kultūrām. • HIV, HBV, Micobacterium tuberculosis • Transformētajās šūnās - SV-40, EBV, HBV, u.c. vīrusi. • Ļaundabīgo audzēju šūnu pašinokulēšanās. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  41. ĢMO Ar GI metodēm tiek veidoti ģenētiski modificēti organismi (ĢMO) ĢMO ir dzīvs organisms, kurā tā ģenētiskais materiāls ir izmainīts veidā, kas nevar notikt dabiskās vairošanās, krustošanās un rekombinācijas rezultātā. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  42. ĢMO Organismu ģenētiska modificēšana notiek izmantojot: • rekombinās DNS tehnoloģijas metodes – - jaunu ģenētiskā materiāla kombināciju veidošanu, ārpus organisma ar dažādiem līdzekļiem ievadot nukleīnskābju frag- mentus vīrusā, baktēriju plazmīdā vai citā vektorsistēmā; - tādu nukleīnskābju nogādāšana šūnās, kuras tajās neveidojas dabiski, taču spēj turpināt vairošanos; Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  43. ĢMO Organismu ģenētiska modificēšana notiek izmantojot: • metodes, kas saistītas ar ārpus organisma izveidotā ģenētiskā materiāla tiešu ieva- dīšanu organismā, Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  44. ĢMO Organismu ģenētiska modificēšana notiek izmantojot: • šūnu un protoplastu sapludināšanas vai hibridizācijas metodes - šūnu veidošanu ar jaunām ģenētiskā materiāla kombinā- cijām, sapludinot divas vai vairākas šūnas no sistemātiski attālām organismu grupām un izmantojot paņēmienus, kas nav sastopami dabā. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  45. LR likumdošana 2000/54/ECdirektīvā izvirzītās prasības atspoguļo MK noteikumi Nr.189 (2002) "Darba aizsardzības prasības, saskaroties ar bioloģiskajām vielām" kuri daudzkārt papildināti un laboti, pēdējie labojumi ar MK noteikumiem Nr.265 (2012) http://www.likumi.lv/doc.php?id=62417 Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  46. LR likumdošana 2007. gada 15. novembrī pieņemts un izsludināts "Ģenētiski modificēto organismu aprites likums" kurš stājies spēkā ar 2007. gada 19. decembri, Vairākkārt mainīts, pēdējās izmaiņas 2012. gada 10. jūlijā. http://www.likumi.lv/doc.php?id=167400 Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  47. LR likumdošana Uz "Ģenētiski modificēto organismu aprites likuma" un ES direkrīvu un regulu pamata izstrādāti vairāki MK noteikumi: MK noteikumi Nr.784 (2008) "Ģenētiski modificēto organismu ierobežotās izmantošanas un atļaujas izsniegšanas un anulēšanas kārtība" Pieņemti - 22.09.2008. Stājas spēkā - 01.12.2008 Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  48. LR likumdošana Uz "Ģenētiski modificēto organismu aprites likuma" un ES direkrīvu un regulu pamata izstrādāti vairāki MK noteikumi: MK noteikumi Nr.1078 (2008) "Ģenētiski modificēto organismu riska novērtēšanas metodoloģija" Pieņemti - 22.12.2008. Stājas spēkā - 30.12.2008 Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  49. LR likumdošana Uz "Ģenētiski modificēto organismu aprites likuma" un ES direkrīvu un regulu pamata izstrādāti vairāki MK noteikumi: MK noteikumi Nr.453 (2009) "Noteikumi par valsts nodevu par ģenētiski modificēto organismu riska novērtējuma atzinuma sagatavošanu" Pieņemti - 19.05.2009. Stājas spēkā - 27.05.2009. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

  50. LR likumdošana Uz "Ģenētiski modificēto organismu aprites likuma" un ES direkrīvu un regulu pamata izstrādāti vairāki MK noteikumi: MK noteikumi Nr.457 (2009) "Noteikumi par ģenētiski modificēto organismu apzinātu izplatīšanu" Pieņemti - 26.05.2009. Stājas spēkā - 30.05.2009. Mikrobioloģijas un biotehnoloģijas katedra ML

More Related