Laboratorio Área Tecnología de Producción, Ingeniero Carlos Cantera Centro de Investigación y Tecnología del Cuero , CI

1. Laboratorio Área Tecnología de Producción, Ingeniero Carlos Cantera • Centro de Investigación y Tecnología del Cuero , CITEC • Campus Tecnológico CIC- INTI cueros • Camino Centenario y 505, MB Gonnet- La Plata

2. OBJETIVOS • General :Desarrollo de depilado enzimático • Específico : Vulnerar la epidermis del bovino para permitir la difusión de preparados enzimáticos comerciales. Los procesos difusivos,a través de los estratos de la epidermis, desempeñan un papel preponderante para que las enzimas alcancen más rápidamente sus sitios de acción y expresen su actividad depilatoria . La epidermis se presenta como una barrera a la que es necesario atravesar para que las enzimas lleguen a destino . • Yates, J.R.Studies in depilation. IX. Effect of skin thickness and diffusion on the rate of depilation of sheepskins, J. Am.Leath.Chem.Ass, 64, 71-81, 1969

3. Empleo de Microscopía Óptica, Microscopía Electrónica de Transmisión y Espectroscopía FT-Raman en el análisis de la epidermis bovina • En este trabajo se analizaron a escala de laboratorio mediante Microscopía óptica, Microscopía Electrónica de Transmisión y Espectroscopía FT-Raman las modificaciones a nivel morfológico y molecular la epidermis del bovino luego de exponerla a tratamientos que intentan vulnerarla.

4. Reactivos utilizados para vulnerar la barrera epidermis • SO3Na2 (sulfitólisis) queratina • Dodecilsulfato de sodio ( SDS) emulsifica lípidos intercelulares Ensayos preliminares a escala de laboratorio evidenciaron que SDS+sulfito de sodio+ Tripsina, sobre sustrato epidermis , aumentaban la degradación del sustrato Cantera, C.S.; Goya, L.; Galarza , B.Hair saving unhairing process. Part 5-Characterization of enzymatic preparations applied in soaking and unhairing processes; J.Soc.Leath.Tech.Chem.2003; 87 : 69-77.

5. epidermis

6. Foto 3

7. Foto 4

8. Foto 5

11. Microscopía Óptica22 horas MICROSCOPÍA ÓPTICA • SO3Na2 + SDS5 horas • Preparado enzimático comercial derivado de proteasas animales ( tripsina)+Proteasa alcalina 17 horas • Coloración Tricrómica Control

12. Microscopía Electrónica de Transmisión – MET5 horas 2 horas MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA DE TRANSMISIÓN SO3Na2 + SDS Preparado enzimático comercial( proteasa de origen animal , tripsina ) 3 horas sulfito de sodio 1,23g/l :Se encontró separación entre lámina basal y capa basal del epitelio .

13. Corte semifino, Azul de toluidina Sulfito de sodio 1,23g/l 2h+ preparado enzimático comercial de origen pancreático 3h.

14. N ML/13/06 SULFITO M- 1 N M- N N 1 * * * LM Estrato basal. 1- espacio intercelular N- núcleo. M- melanosoma.LM- Lámi- na basal espacio modificado*

15. Espectroscopía FT- Raman Trozos de piel bovina de 10 cm x 10 cm se cubrieron durante 24 horas con: • Terpenos • Emulsión acuosa a base de : surfactantes y terpenos • Buffer de bicarbonato (control)

16. Figura 9

17. Resultados FT- Raman • los espectros obtenidos en la región entre 2800 cm-1 a 3050 cm -1 corresponden al espectro vibracional de los enlaces C-H mayoritarios en la composición lipídica . • Fue posible adaptar la técnica a pesar de las dificultades que presenta la piel del bovino, pelos gruesos, espesor del estrato corneo, distribución de lípidos intercelulares

18. Conclusiones CONCLUSIONES FT-Raman : fue posible adaptar la técnica a pesar de las dificultades que presentaba la piel del bovino: • Manto de pelos gruesos • Espesor del estrato corneo • Distribución de lípidos intercelulares Microscopía Electrónica de Transmisión: los resultados preliminares demostraron que es una herramienta útil para evaluar los pretratamientos y tratamientos utilizados para aflojar el pelo del bovino