Céline Comte , Christian Tessier, Jérôme Bellenger, Sandrine Bellenger et Michel Narce

1. Influence de CLA1 & CLA2 sur la signalisation par les acides gras polyinsaturés lors de l’intolérance au glucose Céline Comte, Christian Tessier, Jérôme Bellenger, Sandrine Bellenger et Michel Narce UMR 866 INSERM Université de Bourgogne Physiopathologie des Dyslipidémies - Dijon

2. Et maintenant Introduction Les Acides Linoléiques Conjugués (CLA) Terme générique désignant un mélange d’isomères géométriques et positionnels de l’acide linoléique Principales sources alimentaires : Produits carnés et laitiers de ruminants

3. trans-10, cis-12 CLA =CLA2 cis-9,trans-11 CLA =CLA1 Acide linoléique Introduction Les Acides Linoléiques Conjugués (CLA) (Pariza et coll., 2001)

4. Introduction Effets des CLA Nombreux effets biologiques mis en évidence: • Obésité • Cancer • Inflammation • Athérosclérose • Diabète… Mais… De nombreuses contradictions dans la littérature

5. Amélioration de la tolérance au glucose Amélioration de la sensibilité à l’insuline Prévention de l’hyperinsulinémie (Houseknecht et al., 1998) (Ryder et al., 2001) (Nagao et al., 2003) du taux d’insuline plasmatique Apparition d’une résistance à l’insuline de la glycémie et de l’insulinémie à jeun (Tsuboyama-Kasaoka et al., 2000) (Clément et al., 2002) (Roche et al., 2002) Introduction Diabète de type 2 et CLA Effets bénéfiques Effets délétères

6. ? Diabète de type 2 CLA Protocole expérimental Introduction Diabète de type 2 et CLA Pourquoi ces contradictions ? • Différences entre les espèces (rat vs souris) • Statut physiologique (normal vs diabète type 2 ou syndrome métabolique) • Durée des études • Quantité et proportion des isomères de CLA…

7. Interférences avec le métabolisme des AGPI activités delta-6 et delta-5 désaturantes (Chuang et al., 2001 ; Chuang et al., 2004 ; Bretillon et al., 1999 ; Eder et al., 2002 ; Slomma et al., 2004) Introduction Métabolisme des CLA Les CLA peuvent suivre les mêmes voies métaboliques que LA. (Banni, 2002)

8. Introduction Rôles des AGPI D’après Guesnet et coll., 2005

9. C H2 — O — C O — R 1 1 PLA2 O R — C O — O — C H 2 2 C H2 — O — P — O X 3 O AGPI (DGLA, AA, EPA) Cyclooxygénases (COX) Eicosanoïdes (prostaglandines, thromboxanes) Introduction Signalisation par les AGPI – Les Phospholipases A2 (PLA2) Catalysent la première étape de synthèse des eicosanoïdes

10. - activité PLA2 par CLA1 et CLA2 - activité et expression sPLA2 par CLA2 expression cPLA2 IV par CLA1 et CLA2 activité et expression sPLA2 par CLA1 et CLA2 Activité PLA2 dans le foie lors d’une supplémentation avec CLA1 ou CLA2 ? Introduction Interférences avec la signalisation par les AGPI 3 études in vitro sur cellules humaines : • Macrophages (Stachowska et coll., 2007) • Cellules musculaires lisses vasculaires (Ringseis et coll., 2005) • Cellules endothéliales aortiques (Eder et coll., 2003)

11. Interférence avec métabolisme AGPI Effets contradictoires sur la diabète de type 2 et la tolérance au glucose Perturbations activités PLA2 activités D5D et D6D CLA1 & CLA2 CLA1 & CLA2 Lors du diabète de type 2 Signalisation par les AGPI ?

12. Diabétique type 2 Supplémentation avec CLA1 ou CLA2 But du travail Signalisation par les AGPI (PLA2)

13. Injection de tampon citrate Injection de 65 mg STZ/kg PC, dissoute dans du tampon citrate Animaux Témoins Animaux STZ Au sevrage 1% ISIO4 1% CLA1 1% CLA2 1% ISIO4 1% CLA1 1% CLA2 Lot I T Lot C1 T Lot C2 T Lot I S Lot C1 S Lot C2 S Sacrifice à l’âge de 4 mois Matériels & Méthodes Nouveaux-nés Wistar âgés de 2 jours

14. 4 c b 3,5 T ISIO S ISIO 3 T CLA1 b 2,5 c S CLA1 Glycémie (g/L) 2 b, c a T CLA2 b 1,5 a S CLA2 a 1 0,5 0 0 30 60 90 120 Temps (min) Matériels & Méthodes Caractérisation du modèle Test de Tolérance au Glucose Intolérance au glucose des animaux STZ CLA2 semble avoir un effet délétère

15. 1,8 a 1,6 1,4 c 1,2 b b ISI (mg . l2 / mmol . mU . min) 1 b,d 0,8 d 0,6 0,4 de la sensibilité à l’insuline des animaux STZ CLA1 + CLA2 semblent avoir un effet délétère 0,2 0 ISIO 4 T ISIO 4 S CLA1 T CLA1 S CLA2 T CLA2 S Matériels & Méthodes Caractérisation du modèle Index de Sensibilité à l’Insuline (ISI)

16. Matériels & Méthodes Signalisation par les AGPI Expression génique PLA2 Activités sPLA2 & cPLA2

17. sPLA2 IIA cPLA2 IV iPLA2 VI Signalisation par les AGPI – Les Phospholipases A2 (PLA2) PLA2 sécrétées (sPLA2) PLA2 cytosolique Ca2+-dépendantes (cPLA2) PLA2 cytosolique Ca2+ -indépendantes (iPLA2) Impliquées dans état inflammatoire

18. activité sPLA2 chez animaux STZ et par CLA1 & CLA2, expression uniquement dans lots STZ a 100 ISIO 4 T ISIO4 S b b,c b,c b,c 80 CLA1 T CLA1 S c 60 CLA2 T CLA2 S 40 20 0 b a,b a 140 (% des valeurs contrôles I T) Activité sPLA2 120 c c,d 100 d 80 ARNm sPLA2 IIA/L19 (% des valeurs contrôles I T) 60 40 sPLA2 IIA 20 0 Résultats Signalisation par les AGPI – sPLA2

19. 120 ISIO 4 T ISIO4 S a a a 100 a a 120 a CLA1 T CLA1 S 80 100 CLA2 T CLA2 S 60 80 40 60 20 40 0 20 expression cPLA2 IV par CLA1 et chez animaux STZ CLA2 0 a a,c c a a b a,b b (% des valeurs contrôles I T) Activité cPLA2 c b d expression iPLA2 VI par CLA2, renforcée chez animaux STZ d ARNm gène cible/L19 (% des valeurs contrôles I T) cPLA2 IV iPLA2 VI Résultats Signalisation par les AGPI – cPLA2

20. Synthèse eicosanoïdes ? Signalisation par les AGPI ? Conclusion Lors d’une supplémentation en CLA1 ou CLA2 lors de l’intolérance au glucose : CLA2 CLA1 Perturbations activité ou expression PLA2

21. Merci de votre attention !!