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“ APOPTOSIS ”

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“ APOPTOSIS ”

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Presentation Transcript

  1. “APOPTOSIS”

  2. “Apoptosis vs Necrosis”

  3. Características de las células apoptóticas • Reducción del volumen celular • Compactación de las organelas • Condensación de la cromatina • Degradación internucleosomal del ADN • Exposición de fosfatidil-serinas en el lado externo de la membranaplasmática • Formación de “cuerpos apoptóticos”

  4. Extrusión de la célula apoptótica

  5. Apoptosis en células derivadas de epitelio uterino Línea celular RENTROP tratadas en medio con 1% de libre de esteroides durante 24 h A: Control B: RU486 10-6 M C: R5020 10-8 M Pecci et al,J.B.C. 1997,272:11791

  6. Tinción con DAPI

  7. TUNEL

  8. Ensayo de Anexina V

  9. C. elegans.... el principio.... • ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)

  10. Vías principales de apoptosis en mamíferos Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770

  11. Caspasas cysteine-dependent aspartate-specific proteases

  12. Tabla de caspasas

  13. Vías principales de apoptosis en mamíferos Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770

  14. Activación por receptores de muerte • ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)

  15. Eventos mitocondriales

  16. Superposición de imágenes Marcador Mitocondrial Citocromo C Control Dexa 10-8 M Efecto de la dexametasona sobre la liberación del citocromo C

  17. ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)

  18. Proteínas de la familia de Bcl-2 Gross et al,Genes Dev. 1999,13:1899

  19. Miembros de la familia de Bcl-2 • Los niveles relativos de los miembros anti/pro-apoptóticos determinan el destino celular. • Los miembros antiapoptóticos se localizan en membranas. Los proapoptóticos principalmente en citoplasma y se translocan a la mitocondria ante un estímulo de muerte. • Regulan la liberación desde la mitocondria de proteínas que inducen la apoptosis.

  20. Vías principales de apoptosis en mamíferos Hengartner et al, Nature, 2000, 407: 770

  21. ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)

  22. Translocación de GFP-Bax Biochem. J. (2002) 367 (169–178)

  23. (A) GFP–Bax-transfected cells, stimulated with staurosporine. (B) GFP–Bax and GFP were immunoprecipitated and analysed for GFP–Bax, VDAC and ANT. The non-immunoprecipitated VDAC and actin in the supernatant (SN) were also measured. (C) Shows the selectivity of the anti-ANT polyclonal and anti-VDAC monoclantibodies used on mitochondrial extracts. Biochem. J. (2002) 367 (169–178)

  24. Posibles mecanismos de acción de los miembros de la familia de Bcl-2

  25. 1 2,35 1 1 1 1,1 1,6 --- 1 1 1,02 0,9 La dexametasona aumenta los niveles de Bax y disminuye los de Bcl-XL en timocitos in vitro in vivo Control Dexa Control Dexa Bax Bax Bcl-2 Bcl-2 Bcl-XL Bcl-XL Bcl-XC

  26. Regulación por IAPs

  27. Vías principales de apoptosis en mamíferos • ApoReview: Introduction to Apoptosis. Andreas Gewies (2003)