1 / 27

Apport de la cytométrie de flux dans le diagnostic et le suivi du myélome multiple

Apport de la cytométrie de flux dans le diagnostic et le suivi du myélome multiple. Tozeur 2008. La CMF. Méthode d’analyse des cellules en suspension Permet de discriminer au sein d’un échantillon des sous populations homogènes par leurs:

geri
Télécharger la présentation

Apport de la cytométrie de flux dans le diagnostic et le suivi du myélome multiple

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Apport de la cytométrie de flux dans le diagnostic et le suivi du myélome multiple Tozeur 2008

  2. La CMF • Méthode d’analyse des cellules en suspension • Permet de discriminer au sein d’un échantillon des sous populations homogènes par leurs: Taille, Structure et expression des antigènesmembranaires, intra-cytoplasmiques et/ou intra-nucléaires. (anticorps monoclonaux couplés à des fluochromes)

  3. Performances • Analyse multiparamètrique • Analyse quantitative • Un GRAND nombre de cellules Limites • Le nombre et la viabilité des cellules dans l’échantillon initial • Disponibilité des anticorps monoclonaux

  4. APPORT DE LA CMF DANS LE MYELOME MULTIPLE DIAGNOSTIQUE PRONOSTIQUE MALADIE RESIDUELLE

  5. APPORT DE LA CMF DANS LE MYELOME MULTIPLE DIAGNOSTIQUE

  6. Numération des plasmocytes dans l’échantillon de moelle • Différencier les plasmocytes normaux et anormaux expression aberrante la monoclonalité

  7. La CMF /Dg MM MM/MGUS/Plasmocytose réactionnelle • Résoudre difficultés de Dg(+) MM à IgM MM atypique MM non secrétant • Identifier l’expression d’Ag cibles thérapeutiques: CD20 CD52

  8. La caractérisation des plasmocytes selon un phénotype spécifique unique :repose sur • l’expression du CD38 et du CD 138 CD38 CD138 Syndecan 1

  9. Distribution des cellules selon la Taille et la structure L’inclusion des régions R1 et R2 permet d’isoler les plasmocytes des autres cellules médullaires Leur numération % plasmocytes = (nb plasmocytes / nb leucocytes) X 100

  10. CD45:pan-leucocytaire

  11. Phénotype des plasmocytes malins • Présentent des aberrations phénotypiques absentes dans les plasmocytes normaux: • CD19 ־ • CD56++ glycoprotéine mb, NK, N-CAM. • Impliquée dans l’adhésion et la migration tumorale

  12. Am J Clin Pathol.2004 Apr. 121 (4):482-8 306 MM Hematologica.2006; 91:1234-40 Review Blood 1990;76(2):377-382 Plasmo CD 56+

  13. la monoclonalité Lambda Kappa Critère formel pour la malignité

  14. Ainsi un panel minimum: CD38, CD138, CD56, CD19, CD45, CLKappa, CLLambda En 3 à 6 couleurs Suffisant pour l’analyse par CMF du MM Coût relativement faible

  15. Notre expérience Juin 2005- septembre 2008 170 échantillons de moelle 65 dg 105 suivi thérapeutique Induction Dexa-Thalidomide Randomisation GB GA Autogreffe Double autogreffe Dexa-thalidomide 2ème autogreffe si rechute A Abdelkefi Blood 2007

  16. CMF applicable dans tous les cas • Discrimination du phénotype anormal /tous les cas • phénotype normal (CD19+ CD56-CD45+) / plasmocytes malins aprèsTTT

  17. Plasmocytes Taille, structure, CD38high, CD138 Plasmocytes normaux Cellules myélomateuses Leucémie à plasmocytes CD19+ CD45high CD56- CD19 - CD45dim/- CD56high CD28+ CD19- CD45dim CD56dim CD28+

  18. APPORT DE LA CMF DANS LE MYELOME MULTIPLE PRONOSTIQUE

  19. Report of European Myeloma network Haematologica 2008 Rawstron el al Blood 2003 Ratio plasmocytes anormaux/plasmocytes normaux Ratio > 97/3: MM indolent plutôt que MGUS J.F San Miguel et al. Blood 2007 407 MGUS, 93SMM Ration élevé > 95% risque de progression élevé PFS à 5ans Stratégie de suivi guidée par la CMF

  20. Bataille R.et al. Cancer Res1995/ San Miguel et al. Br J Haematol 1991 Perte du CD45 est en corrélation avec la sévérité de la maladie Sahara Net al Br J Haematol 2002 La perte du CD56 dans le MM déclare la transformation leucémique de la maladie Mateo G et al Cancer Res 2005/Robillard N Blood 2003…(Associations décrites de l’expression antigéniqueavec des anomalies génétiques) Valeur limite dans le screening génétique

  21. Dingli D Blood 2005 246 MM pré-autogreffe Plasmocytes circulantsmaladie active Rajkumar V Blood 2005 302 MM au Dg Plasmocytes circulants facteur indépendant prédictif de la survie

  22. APPORT DE LA CMF DANS LE MYELOME MULTIPLE Maladie résiduelle

  23. Seuil de détection de la MDR par CMF: 10-4 10 plasmocytes malin/ 100000 éve 100/1000000 éve

  24. Sensibilté Immunofixation < CMF< PCR Valeur prédictive de la survie Immunofixation < CMF = PCR

  25. Rawstron et al Blood 2002: 45 MM Sensibilité 0,01%. Intérêt à 3 mois post autogreffe en terme d’évaluation précoce de la progression. Plus sensible que l’immunofixation • 33 Immunofixation (-) • 9 MDR+ 24 MRD – • DFS DFS • 20 mois 34,5mois

  26. J.F San Miguel et al. Haematologica 2005 • 32 MM • ASO-PCR /CMF • Applicabilité: • 75% / 90% • Sensibilité: • Légèrement supérieur pour la PCR: • 6patients: MDR: PCR+/CMF -: clone tumoral faible Même valeur prédictive de la survie à un seuil de 10-4

  27. J.F San Miguel et al. Blood 2008 295 MM MDR J100 post autogreffe Analyse multivariée: le facteur pronostic le plus important/ progression de la maladie Leukemia 2006 MDR – critère de réponse complète: critères IWMG

More Related