Proteínas de fase Aguda & Sistema de Complemento

1. Proteínas de fase Aguda & Sistema de Complemento

2. Estão na sua maioria no plasma e são produzidas por hepatócitos em resposta a citoquinas ditas inflamatórias, como IL-6, IL-1 e TNF, libertadas por macrófagos e NK. Estas PFA podem ser produzidas “de novo” pós infecção- CRP ou já estar presentes em níveis séricos baixos e depois»»- Fibrinogénio Proteínas Inflamatórias (PFA)

3. Proteínas Inflamatórias (PFA) • Apesar de serem detectadas pós-infecção, também estão associadas a danos tecidulares causados por outro tipo de doenças , ex:Artrite Reumatóide. • Possuem várias funções nas quais se destacam a activação do sistema de complemento, a opsonização de microorganismos invasores e a limitação de danos tecidulares causados pelos mesmos. Destacam-se a : • -CRP ( C-Reactive protein) • -SAA ( Serum amyloid protein A ) • -MBP ( Mannose binding protein)

4. Proteínas Inflamatórias (PFA)Resposta Inflamatória Aguda

5. Sistema de Complemento

6. Deste sistema fazem parte cerca de mais de 30 proteínas solúveis presentes constitutivamente no sangue (»5%) na sua forma inactiva São sintetizadas por hepatócitos e monócitos e têm um papel “pivot” na resposta inata Os factores de complemento são designados por números ou letras: os fragmentos peptídicos derivados da activação de um componente designam-se por letras minúsculas, sendo o componente “a” resultante da clivagem, e é sempre o mais pequeno ( excepção do C2a) Resumindo C1 a C9 ou símbolos escritos como por ex. Factor D Fragmentos peptídicos em minusculas ( C3a, C3b) a- menor produto clivado Os fragmentos de complemento interagem formando complexos funcionais que se designam com um traço superior, ex : C4b2a Sistema de Complemento

7. Sistema de Complemento • Pode ser activado de 3 maneiras, denominadas vias de activação: • 1-Via Clássica- activação por ligação de anticorpos á superfície bacteriana ou antigénica; destes anticorpos apenas IgM e IgG podem activar o sistema • 2-Via Alternativa- activação pela ligação dos seus componentes (C3b) a determinadas moléculas á superfície dos micróbios • 3- Via das Lectinas- • Todos estes 3 meios de activação do sistema derivam na formação do componente C5b a C9 – formação do MAC

8. Sistema de Complemento Funções: • 1- Lise de células, bactérias e vírus (MAC) • 2- Opsonização, promovendo a fagocitose de antigénios • 3- Remoção de complexos imunes da circulação (complexos Ag-Ab) • 4- Inflamação e secreção de moléculas que amplificam a resposta imune (secretadas por mastócitos, PMNs,…..)

9. Componentes importantes na activação: C1-Clássica C3b-Alternativa MBP-Lectinas Factor comum a todas as vias: hidrólise do C3 e formação do MAC Anafilotoxinas: C5a, C4a e C3a Citotóxico: C1 Sistema de Complemento

10. Sistema de ComplementoVia Clássica

11. Sistema de ComplementoVia Clássica • Nesta via cada molécula C1 tem que se ligar pela suas cabeças globulares a pelo menos 2 sítios Fc do anticorpo, formando uma configuração estável C1-Ab. • Quando a IgM pentamérica se liga á porção C1q adquire a configuração de “agrafe”- activando a via; no entanto a IgM tem que apresentar esta forma, pois a sua forma circulante é planar, não expondo os seus sítios de ligação Fc • No caso da IgG esta molécula só possui um único sítio de ligação Fc, logo são necessárias 2 moléculas de IgG, que devem estar juntas num espaço de 30-40nm á superfície da célula target

12. C1 é a molécula mais importante na activação desta via do sistema de complemento. Consiste num complexo C1q e 2 moléculas C1r e C1s Activação por uma molécula de IgM ou duas moléculas de IgG Esta via pode ser activada por factores não-imunológicos: certas bactérias, virus ou mesmo células apoptóticas- podem interagir directamente com C1q Sistema de ComplementoVia clássica

13. Sistema de ComplementoVia Alternativa • Desta via fazem parte alguns componentes- factores únicos, enquanto que na via clássica e das lectinas só fazem parte componentes C

14. Nesta via a continuação da cascata enzimática passa pela ligação do Factor B ao C3b ( ligação não-covalente) e pela clivagem deste complexo pelo Factor D. A via alternativa culmina também na formação do MAC e amplifica a geração de C3b , via clássica, da resposta imune Sistema de ComplementoVia Alternativa

15. Sistema de ComplementoVia Alternativa • Concluindo a proteínas séricas mais importantes nesta via são: • MBL- “Mannan binding protein”- ±idêntica ao C1q da via clássica- reconhece certos carbohidratos á superficie dos microorganismos e inicia a via alternativa • C3a : peptido mediador da inflamação (anafilotoxina) • C3b : peptido que se liga ao factor B, clivado pelo Factor D • Factor B e Factor D formam a C3 convertase • Properdina : liga-se ao complexo C3bBb (C3 convertase) tornando-o estável e permitindo a continuação da cascata

16. Sistema de ComplementoVia Alternativa/Clássica • C3b como OPSONINA

17. Sistema de ComplementoVia Alternativa/Clássica • C3b remove imunocomplexos

18. Sistema de ComplementoVia Alternativa/Clássica • Anafilatoxinas C3a, C4a e C5a • (importantes no processo inflamatório)

19. Sistema de ComplementoVia Alternativa/Clássica • C1 - citotoxicidade

20. A sequência terminal de activação do sistema de complemento envolve os componentes C5b,C6,C7,C8 e C9, que interagem sequencialmente para formar a estrutura designada MAC. Este complexo composto de fosfolípidos forma um canal transmembranar que causa a disrupção da célula target/bactéria, através da entrada e saída de moléculas Sistema de ComplementoSequência Terminal: MAC

21. Sistema de ComplementoSequência Terminal: MAC • A ligação do C8 ao complexo membranar C5bC7, induz uma alteração conformacional no C8, expondo uma região hidrofóbica que interage com a membrana plasmática • Com a polimerização do C9, uma molécula tipo perforina, a cascata termina formando o MAC

22. Sistema de ComplementoSequência Terminal: MAC

23. Sistema de Complemento (resumo) • Efeitos Biológicos dos produtos do Sistema de Complemento: • - lise membranar causada pela reacção C5b-C9= MAC • -resposta inflamatória gerada pela desgranulação dos mastócitos e pela produção de anafilotoxinas • -opsonização de antigénios (» fagocitose) • -solubilização e remoção de complexos imunes, ex: SLE

24. Eficaz na lise de Gram – e Gram+ As bactérias encapsuladas são mais resistentes As proteinas de regulação são as RCA, e são na sua maior parte codificadas por genes presentes no cromossoma 1 Sistema de Complemento (resumo)

25. Sistema de Complemento (regulação) • A regulação do sistema de complemento é bastante restricta de maneira ao próprio hospedeiro não sair prejudicado e com doença, daí que existem os chamados Reguladores do Complemento que podem ser: • 1- de fase fluida e 2- “Cell Bound” • De fase fluída • Inibidor C1 – C1INH (angioedema hereditário) • C4 • Factor I e factor H • Proteína S • Cell Bound • Receptores C1q • Receptores C3 • DAF ( decay- accelerating factor) • CD59

26. Sistema de Complemento (regulação) • As deficiências mais comuns são as do componente C3 – central para as 3 vias, que tornam o indivíduo mais susceptível a infecções bacterianas recorrentes. • A deficiência no C1 ( afecta via clássica) é causadora de angioedemas • Deficiências em componentes do MAC tornam o individuo susceptivel a infecções bacterianas, apesar de se produzir o C3b

27. Cascata Das Cininas

29. Cascata das Cininas • As cininas (kininas)- bradicinina e lisebradicinina são importantes mediadores da resposta inflamatória. São libertadas por percursores, as kinogenages das quais foram já identificadas 3 tipos: são sintetizadas por hepatócitos e libertadas para o plasma e as suas funções, para além da libertação de cininas são: • co-factores na cascata de coagulação • inibidoras da enzima cisteina protease • parte da resposta inflamatória aguda • As cininas são potentes vasoactivos e as suas propriedades incluem a capacidade de aumento da permeabilidade vascular, a vasodilatação, a contracção do musculo liso e a estimulação do metabolismo do ácido araquidónico.